| 绿脓杆菌芳香硫酸酯酶序列与活性关系的初步表征 |
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| 引用本文： | 李雨薇,袁梅,杨晓兰,廖飞. 绿脓杆菌芳香硫酸酯酶序列与活性关系的初步表征[J]. 重庆医科大学学报, 2018, 43(1): 107 |
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| 作者姓名： | 李雨薇 袁梅 杨晓兰 廖飞 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学检验医学院，重庆 400016 |
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| 摘 要： | 目的：通过定点突变初步表征绿脓杆菌芳香硫酸酯酶（Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase，PAAS）序列-活性关系，识别通过迭代饱和突变提高突变体比活性的合适位点。方法：分析PAAS活性中心三维构象初步识别催化相关位点；定点突变获得突变体，重组表达后Ni2+-NTA亲和纯化，表征其酶学性质。结果：与野生型相比，R55、M72、G138、D317、K375等位点用常见氨基酸替换/突变都显著降低其催化活性；R55、D317和K375等突变显著降低底物选择性和/或热稳定性，而M72和G138突变主要改变其催化活性。结论：M72和G138适合作为通过迭代饱和突变实施定向进化的候选位点。
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| 关 键 词： | 芳香硫酸酯酶；定点突变；表征 |
Preliminary characterization of sequence-activity relationship of Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase |
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| Li Yuwei,Yuan Mei,Yang Xiaolan,Liao Fei. Preliminary characterization of sequence-activity relationship of Pseudomonas Aeruginosa arylsulfatase[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2018, 43(1): 107 |
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| Authors: | Li Yuwei Yuan Mei Yang Xiaolan Liao Fei |
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