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miR-181a在急性淋巴细胞白血病患儿中的表达及其功能研究
引用本文:廖旺,刘晓丹,彭红霞,徐令.miR-181a在急性淋巴细胞白血病患儿中的表达及其功能研究[J].中华血液学杂志,2015,36(1).
作者姓名:廖旺  刘晓丹  彭红霞  徐令
作者单位:1. 510623,广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心出生队列研究室
2. 510623,广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心科教信息科
摘    要:目的 检测microRNA-181a(miR-181a)在急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿中的表达水平,并研究其在ALL细胞株CCRF-CEM细胞及耐药株CEM-C1细胞中的功能.方法 采用实时荧光定量PCR方法检测ALL患儿骨髓样本、ALL细胞株CCRF-CEM细胞及其耐药株CEM-C1细胞中miR-181a的表达水平.采用电穿孔转染的方法抑制耐药株CEM-C1细胞并上调非耐药株CCRF-CEM细胞中miR-181a的表达,予不同浓度梯度(终浓度分别为0.01、0.1、1、10、100、1 000 ng/ml)喜树碱处理后,采用CCK-8法观察各浓度梯度喜树碱处理后细胞的存活情况,绘制细胞增殖抑制曲线并计算半数抑制浓度(IC50).结果 初诊-复发组患儿初诊及复发骨髓样本miR-181a相对表达水平(4.84±2.71及6.53±2.20)均高于对照组(1.41±0.53)(P=0.017、0.001),初诊-完全缓解组患儿初诊骨髓样本miR-181a水平(7.58±2.50)较对照组明显升高(P=0.000),而完全缓解后miR-181a水平下降至1.35±0.35,与对照组比较差异无统计学意义(P=0.863).CEM-C1细胞miR-181a相对表达水平(-4.39±0.08)较CCRF-CEM细胞(-2.32±0.03)明显升高(P=0.000).转染miR-181a抑制剂CEM-C1细胞较转染阴性对照组增殖抑制率明显升高(P<0.05),IC50分别为30.61、2 255.00 ng/ml,耐药指数(RI) =73.67.miR-181a过表达CCRF-CEM细胞较阴性对照组增殖抑制率明显降低(P<0.05),IC50分别为126.60、1.34 ng/ml,RI=94.26.结论 ALL患儿骨髓及CEM-C1细胞中miR-181a异常高表达,抑制CEM-C1细胞中miR-181a的表达可明显增加CEM-C1细胞的药物敏感性,在CCRF-CEM细胞中上凋miR-181a的表达能明显增加CCRF-CEM细胞的耐药性.

关 键 词:白血病  淋巴样  儿童  微RNAs  抗药性  肿瘤

The expression and functional study of miR-181a in pediatric acute lymphoblastic leukemia
Liao Wang,Liu Xiaodan,Peng Hongxia,Xu Ling.The expression and functional study of miR-181a in pediatric acute lymphoblastic leukemia[J].Chinese Journal of Hematology,2015,36(1).
Authors:Liao Wang  Liu Xiaodan  Peng Hongxia  Xu Ling
Abstract:
Keywords:Leukemia  lymphocytic  Child  MicroRNAs  Drug resistance  neoplasm
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