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应用基因芯片分析结核分枝杆菌常见耐药基因型的研究
引用本文:吴雪琼,张琼,张俊仙,梁建琴,鲁红丽,李洪敏,张洪恩,陆阳,荣利,吕翠环,张广宇,邢婉丽.应用基因芯片分析结核分枝杆菌常见耐药基因型的研究[J].中国防痨杂志,2006,28(1):4-10.
作者姓名:吴雪琼  张琼  张俊仙  梁建琴  鲁红丽  李洪敏  张洪恩  陆阳  荣利  吕翠环  张广宇  邢婉丽
作者单位:[1]解放军第309医院结核病中心研究室,北京100091 [2]生物芯片北京国家工程研究中心,北京102206 [3]河北省胸科医院,石家庄050041
基金项目:本课题为“十五”国家重大科技专项“功能基因组和生物芯片”科研基金和军队医学杰出中青年人才科研基金项目(01J020):
摘    要:目的应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌耐药基因型,建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验和PCR-直接测序方法为对照,应用基因芯片快速检测157株结核分枝杆菌临床分离株异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)耐药基因(katG、rpoB、rpaL、rrs和embB)的带荧光素标记的PCR产物。结果PCR-直接测序和基因芯片检测36株结核分枝杆菌药物敏感株的5种耐药基因均为野生型。121株结核分枝杆菌耐药分离株中,56株耐INH分离株,katG基因突变率为62.5%,其中katG缺失率为7.5%,315位密码子突变率为55.4%,279位密码子突变率为1.8%;104株耐RFP株,rpoB基因突变率为94.2%,最常见的突变位点为531位和526位密码子(突变率分别为60.6%、15.4%),双位点突变率为5.8%,还发现511、513、515、516、517、518和533位密码子突变;62株耐SM分离株,rpsL和ITS总突变率为88.7%(两者分别为82.3%、6.5%),rpsL突变位于43位和88位密码子(突变率分别为77.4%、4.8%),rrs突变位于513位和516位碱基(突变分别为4.8%、1.6%);57株为耐EMB株,embB基因突变率为61.4%,均为306位密码子突变,最常见的突变为ATG→GTG或剐rA(突变率分别为35.1%、15.8%),还发现306位密码子ATG→ATC、ATT和CTG突变。通过基因芯片检出的突变与基因测序结果一致。结论应用基因芯片可分析大多数结核分枝杆菌耐药基因型,弥补传统药敏试验方法的不足,指导临床治疗。

关 键 词:基因芯片  耐药基因型  聚合酶链反应  分枝杆菌  结核
收稿时间:2005-08-02
修稿时间:2005-08-02

Identification of drug-resistant gene type in Mycobacterium tuberculosis by PCR- oligonucleotide microchlps
Wu Xueqiong, Zhang Qiong , Zhang Junxian,et al..Identification of drug-resistant gene type in Mycobacterium tuberculosis by PCR- oligonucleotide microchlps[J].The Journal of The Chinese Antituberculosis Association,2006,28(1):4-10.
Authors:Wu Xueqiong  Zhang Qiong  Zhang Junxian  
Institution:1. Tuberculosis Research Laboratory, Tuberculosis Center, the 309 th Hospital of PLA, Beijing 100091, China
Abstract:
Keywords:
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