基于氨基苯甲酸衍生化HPLC-FLD分析中药多糖单糖组成

目的:建立对氨基苯甲酸衍生化(p-AMBA)法高效液相色谱荧光检测多糖单糖组成。方法:采用高效液相色谱荧光检测(HPLC-FLD)方法,色谱柱:Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)和Waters C18(4.6 mm×150 mm,5μm)串联,流速:0.6 m L/min,柱温:35℃,流动相A为0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(p H 2.54),含20 mmol/L四丁基硫酸氢铵;流动相B为流动相A和甲醇按1∶1的体积比混合所得;梯度洗脱,0~12 min,2%~5%B;12~50 min,5%~8%B;50~55 min,8%~20%B,激发波长:313nm,发射波长:358 nm。结果:酸浆多糖含有Gal、Glc、Ara、Gal UA、Glc UA及Rha等6种单糖,其摩尔比为7.26∶6.57∶6.46∶14.04∶20.38∶1.00。结论:该方法灵敏度高、选择性好,可为中药多糖类物质分析提供理论依据。