MR1 siRNA抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖

目的 研究MR1基因对肝癌细胞增殖的影响及机制。 方法 化学合成MR1 siRNA，用脂质体lipofectamine 2000转染肝癌细胞系BEL-7402细胞，RT-PCR检测MR1 siRNA基因沉默效果。用SRB法、集落形成法和生长曲线法检测MR1 siRNA对BEL-7402细胞增殖的影响。流式细胞术检测BEL-7402细胞周期，用细胞同步化的方法，即与G2期阻滞药物噻氨酯哒唑（nocodazole）联合应用，以间接反映MR1 siRNA对肿瘤细胞周期的影响。Western blot法检测Cyclin D1蛋白。结果（1）300nmol/L MR1 siRNA处理BEL-7402细胞24h后，MR1基因的mRNA水平明显降低。（2）经siRNA处理后，BEL-7402细胞存活细胞数明显下降，细胞生长速度明显减慢，集落形成率显著下降，Cyclin D1表达水平明显降低。（3）MR1 siRNA与nocodazole联合处理BEL-7402细胞后，G2期细胞比例显著减少，而G1期细胞明显增多。结论 MR1基因与人肝癌BEL-7402细胞增殖相关，抑制MR1表达，能够引起细胞的增殖抑制，其作用机制与诱导细胞的G1期阻滞有关。

MR1 siRNA suppresses proliferation of human hepatoma BEL-7402 cells