RNA干扰沉默p16基因对小鼠胚胎成纤维细胞衰老的影响 |
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作者姓名: | 路璐 李德冠 张俊伶 黄颂 邢永华 王小春 孟爱民 |
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作者单位: | 300192 天津,中国医学科学院放射医学研究所,天津市放射医学与分子核医学重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81072237);国家重点基础研究发展计划(2011CB964800-G);天津市自然科学基金(08JCY-BJC07300);协和青年基金(3332013044);中央高校基本科研业务费专项资金(3332013044);中国医学科学院放射医学研究所学科发展专项基金 |
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摘 要: | 目的:探讨RNA干扰沉默小鼠p16基因表达对137Csγ射线诱导的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)衰老的影响。方法构建p16 RNA干扰载体,采用实时荧光定量PCR、Western blot和衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察RNA干扰前后辐射诱导衰老的MEF细胞mRNA水平、蛋白水平和衰老细胞百分率等的变化。结果辐射诱导衰老的MEF细胞RNA干扰后24 h,照射+p16 siRNA-1和照射+p16 siRNA-2组p16 mRNA 相对表达水平较照射组显著降低(t=16.52、16.13,P均〈0.05),蛋白水平较照射组显著降低;干扰后5 d,照射+p16 siRNA-1和照射+p16 siRNA-2组SA-β-Gal染色阳性细胞百分比[(34.17±2.08)%和(33.83±1.75)%]明显低于照射组[(68.83±1.26)%](t=37.72、38.09,P均〈0.01)。结论 RNA干扰沉默小鼠p16基因表达能够抑制MEF细胞的衰老,为其在细胞衰老相关研究中的应用奠定了基础。
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关 键 词: | 基因 p16 RNA干扰 ^y射线 小鼠胚胎成纤维细胞 衰老 |
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