从人外毛根鞘细胞分离获取黑素母细胞

目的：毛囊黑素细胞是皮肤黑素细胞的储库，含有黑素母细胞甚至黑素干细胞，具有更强的增殖潜力。观察人毛囊外毛根鞘细胞中黑素细胞的分布特征，尝试分离获取黑素母细胞。方法：实验于2003—0412006—04在解放军第四军医大学组织工程实验中心和武警医学院附属医院皮肤科完成。消化游离流产胎儿头皮（产妇同意由医院处理流产胎儿）毛囊，用黑素细胞培养基接种，原代培养人外毛根鞘细胞，并观察外毛根鞘细胞和黑素细胞的分布。待原代外毛根鞘细胞融合时，加入胰酶消化，大约一半细胞漂浮时，加入含体积分数为0．10小牛血清的DMEM终止，轻柔吹打，弃去飘浮细胞。用DMEM清洗原瓶后加入黑素细胞培养基，继续培养，寻找黑素（母）细胞克隆。并采用胰酶消化法纯化培养黑素细胞。结果：在贴壁生长的毛根周围发现了外毛根鞘细胞团，以毛囊隆突部位为中心呈纺锤形排列。其中含有黑素细胞：临近毛囊漏斗部和毛球部的黑素细胞体积较大，有两个或者多个长一些的树突；隆突部位周围的黑素细胞体积偏小，树枝少而短。经纯化培养获得黑素（母）细胞集落，集落中心细胞呈短梭形，折光性很强，排列密集，增殖活跃；边缘细胞变大，树突延长；集落之间散在分布的黑素细胞体积更大，树突延长，数量增多至3个以上。结论：实验观察到人毛囊外毛根鞘细胞中有黑素细胞分布，并选择性培养获得黑素细胞克隆，分析克隆中心可能含有黑素母细胞。

Isolation of melanoblasts from human outer root sheath