阿那白滞素对病毒性心肌炎小鼠的保护作用及对TLR4/TRAF6通路的影响

目的探究阿那白滞素对病毒性心肌炎小鼠的保护作用及对Toll样受体4(TLR4)与肿瘤坏死因子受体活化因子6(TRAF6)通路的影响。方法将雄性BALB/c小鼠平均分为正常组(A组)、模型组(B组)、阿那白滞素低剂量组(C组)与阿那白滞素高剂量组(D组)4组,每组10只。A组小鼠腹腔注射不含柯萨奇病毒B3(CVB3)稀释液;B组小鼠腹腔注射CVB3病毒悬浮液制备病毒性心肌炎模型;C组、D组均在B组基础上分别注射0.02mL/g、0.2mL/g的阿那白滞素。采用酶联免疫法测定心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)水平;制备心肌组织石蜡切片进行苏木素-伊红染色(HE染色)以及马松染色(Masson染色),细胞流式仪检测心肌细胞凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Westernblot)法测定心肌组织中TLR4、TRAF6、核因子-κB(NF-κB)、髓样分化蛋白88(MyD88)、TIR结构域接头分子(TRIF)mRNA表达。结果与A组比较,B组血清cTnT、CK-MB、MDA水平升高,SOD水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组、D组cTnT、CK-MB、MDA水平降低,SOD水平升高,且D组较C组变化明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色以及Masson染色显示,与A组比较,B组心肌组织病理评分、心肌纤维比例升高,与B组比较,C组、D组心肌组织病理评分、心肌纤维比例降低,且D组降低程度较C组明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组、D组心肌组织凋亡率低于B组,D组心肌组织凋亡率低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组TLR4、TRAF6、NF-κB、MyD88、TRIF的mRNA、蛋白表达均升高;与B组比较,C组TLR4、TRAF6、NF-κB、MyD88、TRIF的mRNA、蛋白表达降低,与C组比较,D组TLR4、TRAF6、NF-κB、MyD88、TRIF的mRNA、蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿那白滞素对病毒性心肌炎小鼠心肌组织具有保护作用,可能与抑制TLR4/TRAF6信号通路相关。

Protective Effect of Anakinra on Viral Myocarditis in Mice and Its Effect on TLR4/TRAF6 Pathway

WANG Fangjie;FENG Yingjun(Henan Children′s Hospital,Zhengzhou 450000,Henan,China)