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α-酮戊二酸钠对CHO-hGPCRc细胞内游离钙离子浓度的影响
引用本文:黄琳仪,朱欣凯,韩春光,吴芳明,王琼,刘永学.α-酮戊二酸钠对CHO-hGPCRc细胞内游离钙离子浓度的影响[J].军事医学科学院院刊,2007,31(1):39-41.
作者姓名:黄琳仪  朱欣凯  韩春光  吴芳明  王琼  刘永学
作者单位:军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850
摘    要:目的:研究α-酮戊二酸钠对CHO-hGPCRc细胞内钙离子浓度的影响,并分析其变化的原因,从功能上进一步鉴定人源G蛋白偶联受体hGPCRc表达细胞的可靠性.方法:将重组表达质粒pcDNA3.1( )-hGPCRc转染入CHO-K1细胞,经G418 (800 μg/ml)作用7~10 d,挑选、扩增阳性克隆,得到CHO-hGPCRc细胞,再以RT-PCR检测所得细胞内hGPCRc mRNA的表达;然后用不同浓度的α-酮戊二酸钠诱导该细胞,通过激光扫描共聚焦显微镜观察Fluo-3标记细胞内钙离子变化,以及细胞外钙离子对其影响.结果:(1)RT-PCR结果表明,所得CHO-hGPCRc细胞能够稳定表达hGPCRc的mRNA;(2)α-酮戊二酸钠可引起细胞内钙离子浓度的变化,表现为钙波动幅度明显增加,并呈浓度依赖性;(3)α-酮戊二酸钠引起的细胞内钙波动,不是细胞外钙离子内流所致,而是细胞内钙库动员的结果.结论:α-酮戊二酸钠为hGPCRc的特异性配基,CHO-hGPCRc细胞能够稳定表达具有功能活性的hGPCRc受体,为进一步开展hGPCRc研究奠定了基础.

关 键 词:hGPCRc  α-酮戊二酸钠  钙离子  CHO-hGPCRc  转染  质粒  二酸钠  细胞内游离钙离子  浓度的影响  Effects  sodium  受体  功能活性  配基  动员  细胞内钙库  内流  细胞外钙  钙波动  浓度依赖性  波动幅度  表现  细胞内钙离子浓度  稳定表达  结果  离子对
文章编号:1000-5501(2007)01-0039-03
修稿时间:2006-09-20

Effects of α-ketoglutarate sodium on [Ca2+]i of the cell line CHO-hGPCRc
HUANG Lin-Yi,ZHU Xin-Kai,HAN Chun-Guang,WU Fang-Ming,WANG Qiong,LIU Yong-Xue.Effects of α-ketoglutarate sodium on [Ca2+]i of the cell line CHO-hGPCRc[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2007,31(1):39-41.
Authors:HUANG Lin-Yi  ZHU Xin-Kai  HAN Chun-Guang  WU Fang-Ming  WANG Qiong  LIU Yong-Xue
Institution:Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China
Abstract:
Keywords:
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