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| CTB-mST2融合蛋白在大肠杆菌表达及其生物活性鉴定 | |
| 引用本文： | 赵聪,张艳红,张部昌,马清钧. CTB-mST2融合蛋白在大肠杆菌表达及其生物活性鉴定[J]. 军事医学科学院院刊, 2007, 31(3): 208-212 |
| 作者姓名： | 赵聪 张艳红 张部昌 马清钧 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850;安徽大学生命科学学院,合肥,230039 2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 3. 安徽大学生命科学学院,合肥,230039 |
| 摘 要： | 目的:表达霍乱毒素B亚单位(CTB)和大肠杆菌突变的热稳定肠毒素(mST)的融合蛋白,并进行抗原性和免疫原性的分析.方法:通过连接肽(linker)将CTB基因和串连的mST连接,然后插入表达载体pET-22b( ),获得克隆,经IPTG诱导获得CTB-mST2融合蛋白.采用多因素正交优选法优化了培养基及培养条件,对表达产物进行包涵体复性后,经过亲合层析纯化得到融合蛋白,并对该融合蛋白抗原性和免疫原性进行了分析.结果与结论:构建了高效表达工程菌,经摇瓶培养,在优化培养基及培养条件下融合蛋白表达量可达320 mg/L,占总蛋白40%.融合蛋白免疫小鼠,可获得高滴度抗CTB和ST血清;将融合蛋白与灭活的O157∶ H7菌体组合免疫小鼠,可产生对O157∶ H7毒株攻击的保护力.本研究可为构建抗ETEC和EHEC复合疫苗提供依据. |
| 关 键 词： | 霍乱毒素B亚单位 大肠杆菌热稳定肠毒素 大肠杆菌O157:H7 疫苗 融合蛋白 大肠杆菌 蛋白表达量 生物活性鉴定 fusion protein Expression assay bioactivity 复合疫苗 EHEC ETEC 研究 保护力 毒株 组合免疫 菌体 灭活 血清 滴度 小鼠 |
| 文章编号： | 1000-5501（2007）03-0208-06 |
| 修稿时间： | 2007-01-15 |
Expression of fusion protein CTB-mST2 in E. Coli and its bioactivity assay |
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| ZHAO Cong,ZHANG Yan-Hong,ZHANG Bu-Chang,MA Qing-Jun. Expression of fusion protein CTB-mST2 in E. Coli and its bioactivity assay[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2007, 31(3): 208-212 | |
| Authors: | ZHAO Cong ZHANG Yan-Hong ZHANG Bu-Chang MA Qing-Jun |
| Affiliation: | 1. Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China; 2. School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230039, China |
| Abstract: | |
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