| 人KLF4基因克隆及重组KLF4慢病毒表达载体的构建? |
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| 引用本文： | 王博涵,余 虓,余 淦,李 恒,肖 巍,徐 华,叶章群. 人KLF4基因克隆及重组KLF4慢病毒表达载体的构建?[J]. 中国组织工程研究, 2013, 17(7): 1238-1242. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.07.018 |
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| 作者姓名： | 王博涵 余 虓 余 淦 李 恒 肖 巍 徐 华 叶章群 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科，湖北省武汉市 430030 |
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| 摘 要： | 背景：KLF4基因在细胞分化过程中有重要作用。目的：构建KLF4基因慢病毒过表达载体。方法：聚合酶链反应扩增(PCR)目的基因KLF4后插入慢病毒表达载体pCDH中，构建重组载体pCDH-KLF4。通过PCR、双酶切和DNA测序方法对其鉴定，共同转染293NT细胞包装病毒，荧光显微镜观察报告基因的表达情况，收集病毒上清，测定病毒的滴度。将重组的慢病毒感染5637细胞，RT-PCR检测KLF4 mRNA的表达。结果与结论：重组慢病毒表达载体质粒经限制性酶切和DNA测序分析证实重组慢病毒载体pCDH-KLF4的插入序列完全正确，重组慢病毒载体感染5637细胞后，细胞内KLF4 mRNA高表达。结果证实，实验成功构建KLF4基因慢病毒过表达载体。
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| 关 键 词： | 组织构建 组织构建细胞学实验 慢病毒载体 KLF4基因 基因重组 5637细胞 载体质粒 DNA测序 组织工程 泌尿系肿瘤 大肠杆菌 DH5a感受态细胞 国家自然科学基金 组织构建图片文章 |
| 收稿时间： | 2012-07-20 |
Clone of human KLF4 gene and construction of recombinant KLF4 lentiviral vector |
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| Wang Bo-han,Yu Xiao,Yu Gan,Li Heng,Xiao Wei,Xu Hua,Ye Zhang-qun. Clone of human KLF4 gene and construction of recombinant KLF4 lentiviral vector[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2013, 17(7): 1238-1242. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.07.018 |
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| Authors: | Wang Bo-han Yu Xiao Yu Gan Li Heng Xiao Wei Xu Hua Ye Zhang-qun |
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| Affiliation: | Department of Urology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, Hubei Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | tissue construction cytology experiments in tissue construction lentiviral vector KLF4 gene gene recombination 5637 cells plasmid vector DNA sequencing tissue engineering urinary tract tumors Escherichia coli DH5a competent cells the National Natural Science Foundation of China tissue construction photographs-containing paper |
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