丹参酮ⅡA抑制心肌细胞的纤维化

背景：转化生长因子β-Smads信号通路是心肌纤维化的关键通路；丹参酮ⅡA具有抑制心肌纤维化作用。 目的：验证丹参酮ⅡA对转化生长因子β1致心肌纤维化的作用并探讨其机制。 方法：取出生24 h内的SD大鼠心脏，利用酶消化法结合差速贴壁体外培养心肌成纤维细胞。取上述第3代心肌成纤维细胞，用5 μg/L转化生长因子β1培养15，30，60，120 min或6，12，24 h后收集细胞，用不同浓度(10-5 mol/L、10-4 mol/L)丹参酮ⅡA预处理2 h后再加入5 μg/L转化生长因子β1培养120 min或24 h后收集细胞，并设空白对照组。免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定，反转录聚合酶链反应检测结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达，Western Blot检测Smad7及磷酸化Smad3蛋白表达。免疫组织化学染色及免疫荧光法检测磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白表达。 结果与结论：转化生长因子β1在一定范围内以时间依赖方式诱导结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原、磷酸化Smad3及Smad7的表达，刺激终末结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原mRNA的表达量明显上升(均P < 0.01)；磷酸化Smad3及Smad7蛋白表达量在刺激后1 h达到峰值，表达量显著增加(均P < 0.01)。高浓度丹参酮ⅡA预处理可显著下调磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原表达(均P < 0.01)。两种浓度的丹参酮ⅡA预处理均可上调Smad7蛋白表达(P < 0.05，P < 0.01)。提示丹参酮ⅡA对心肌纤维化有抑制作用，可能与其上调Smad7蛋白表达，抑制转化生长因子β1诱导的Smad3磷酸化，部分阻断转化生长因子β1-Smads信号通路有关。