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大鼠羊膜上皮细胞体外诱导可分化为类神经干细胞
作者姓名:郭 兵  许家军
作者单位:解放军第二军医大学人体解剖学教研室,上海市 200433
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划,No. 2005CB724302)
摘    要:背景:以往研究发现修复神经损伤的细胞来源主要有许旺细胞、嗅鞘细胞、神经干细胞、激活的巨噬细胞等,但这些细胞存在着来源困难、有成瘤性、异体排斥等缺点。而羊膜上皮细胞不存在以上缺陷,且具有多向分化潜能,经诱导后可向心肌样细胞、神经干细胞、肝细胞、成骨和软骨细胞等分化。 目的:体外培养大鼠羊膜上皮细胞,并诱导其向类神经干细胞方向分化。 方法:取妊娠晚期大鼠,采用胰酶消化法获得羊膜上皮细胞,用无血清的神经干细胞条件培养基对细胞进行诱导分化,并用免疫细胞化学法和RT-PCR对诱导前后的细胞相关标志物进行鉴定。 结果与结论:形态学观察结果显示,条件培养基诱导后的羊膜上皮细胞胞体回缩,胞核部分折光性增强,出现类似于树突及轴突样结构,这些突起可交织成网状,细胞贴壁牢靠。免疫细胞化学检测结果显示,与诱导前相比,条件培养基诱导后的羊膜上皮细胞中巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白荧光强度较强,而特异性胚胎抗原4、波形蛋白荧光强度较弱。RT-PCR检测显示,与诱导前相比,条件培养基诱导后的羊膜上皮细胞的巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、微管相关蛋白mRNA的表达增强,而平滑肌22α、Sox-2及Nanog mRNA的表达减弱。说明体外诱导的大鼠羊膜上皮细胞可成功分化为类神经干细胞。

关 键 词:干细胞  干细胞培养与分化  羊膜上皮细胞  诱导  分化  类神经干细胞  巢蛋白  胶质纤维酸性蛋白  微管相关蛋白  973项目  干细胞图片文章  
收稿时间:2012-12-04

Rat amniotic epithelial cells are induced to differentiate into neural-like stem cells in vitro
Authors:Guo Bing  Xu Jia-jun
Institution:Department of Human Anatomy, Second Military Medical University of PLA, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:stem cells  stem cell culture and differentiation  amniotic epithelial cells  induction  differentiation  neural-like stem cells  Nestin   glial fibrillary acidic protein  microtubule-associated protein  National “973&rdquo  Program of China  stem cell photographs-containing paper  
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