人端粒酶反转录酶对人胚胎皮质神经元损伤的保护

背景：端粒酶可维持端粒长度，避免细胞复制性衰老和凋亡，其催化亚基端粒酶反转录酶还具有抗凋亡和调节细胞生存的作用。目的：观察人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白1-40引起的人胚胎皮质神经元损伤的影响。方法：分离和培养12-16周龄人胚胎皮质神经元，将人端粒酶反转录酶基因重组腺病毒转染至神经元。免疫细胞化学法检测人端粒酶反转录酶基的表达，端粒重复序列扩增酶联免疫吸附法检测端粒酶活性。转染后第3天，给予10 μmol/L β淀粉样蛋白1-40作用24 h后，应用MTT检测细胞活力。荧光探针2’ 7’-二乙酰二氯荧光素标记检测细胞内活性氧水平，比色法测定细胞匀浆中谷胱甘肽含量。结果与结论：转染后第3天，人端粒酶反转录酶的表达最高，并重建了其端粒酶活性；10 μmol/L β淀粉样蛋白1-40显著降低神经元的细胞活力和谷胱甘肽的含量(P < 0.05和P < 0.01)，升高活性氧水平(P < 0.05)。转染了人端粒酶反转录酶基因的神经元能显著对抗β淀粉样蛋白1-40的毒性作用，增加细胞的活力和谷胱甘肽含量(P < 0.05和P < 0.01)，降低活性氧水平(P < 0.05)。结果表明，人端粒酶反转录酶对β淀粉样蛋白1-40引起的人胚胎皮质神经元的损伤有明显保护作用。