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| 一种减少蛋白溶液中内毒素污染的新方法 | |
| 引用本文： | 宣松林.一种减少蛋白溶液中内毒素污染的新方法[J].国际生物制品学杂志,1989(1). |
| 作者姓名： | 宣松林 |
| 摘 要： | 作者采用多粘菌素B-Sepharose 4B(PB-Seph 4B)亲和法与可透析的表面活性剂相结合的方法增加蛋白溶液中内毒素的去除率。将两次结晶的牛肝脏过氧化氢酶制剂溶于水,浓度为43mg/ml,用50mM Tris(pH9.5)在4℃透析24小时,除去制剂中作为抑菌剂的0.1%麝香草酚。50mg PB加入1.6g溴化氰活化的Sepharose 4B中,用0.2M甘氨酸作为阻断剂。结合和阻断后,用0.1M醋酸钠(pH4.0)和0.1M硼酸钠(pH8.0)在室温下交替洗涤3次。为使任何与蛋白质结合的内毒素易于解离,将可透析的表面活性剂辛基-β-D-吡喃葡糖苷(OBDG),加入过氧化氢酶制剂中,使最终浓度为100mM,置室温30分 |
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