| 抗人CDC7单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 李志广,张现伟,蒋小梅,旷兴林,魏大鹏,章崇杰.抗人CDC7单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国当代医药,2012,19(35):13-15. |
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| 作者姓名： | 李志广 张现伟 蒋小梅 旷兴林 魏大鹏 章崇杰 |
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| 作者单位： | 四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室,四川成都,610041 |
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| 基金项目： | 四川大学青年科学基金资助项目(2009SCU11144) |
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| 摘 要： | 目的 制备抗人CDC7蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性.方法 以GST-CDC7为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗人CDC7单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用间接ELISA,Western Blot,免疫细胞化学(ICC)对此抗体特性进行鉴定.结果 筛选到1株能稳定分泌抗人CDC7的细胞株1F7D2C9.亚类鉴定为IgG2a,轻链为kappa链,ELISA法鉴定该抗体腹水效价为1∶102 400,抗体亲和常数为1.558×109 L/mol,Western Blotting分析表明,此抗体能特异识别细胞株的天然CDC7蛋白质.免疫细胞化学进一步显示CDC7分布于细胞核中.结论 成功制备了抗人CDC7单克隆抗体,为研究CDC7与细胞癌变的关系建立了基础.
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| 关 键 词： | 细胞分裂周期蛋白激酶7 单克隆抗体 DNA复制 制备 鉴定 |
Preparation and identification of a monoclonal antibody against human CDC7 |
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| Authors: | LI Zhiguang ZHANG Xianwei JIANG Xiaomei KUANG Xinglin WEI Dapeng ZHANG Chongjie |
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| Institution: | Department of Immunology,School of Preclinical and Forensic Medicine,Sichuan University,Chengdu 610041,China |
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