偶联谷氨酸脱氢酶测定天冬氨酸氨基转移酶同工酶方法的建立

目的:建立谷氨酸脱氢酶(GDH)偶联酶显色法，检测人血清天冬氮酸氮基转移酶(AST，EC2．6．1．1)同工酶。方法:配制琼脂糖凝胶板，摸索实验条件，于SAS1 2全自动电泳仪上电泳，分离AST同工酶，然后偶联GDH作为底物进行孵育、染色、扫描，定量分析结果。结果:该方法偶联GDH 258U／1．在SAS1 2全自动电泳仪上电压150V、时间20min电泳可得到最佳分离AST。同工酶结果(ASTs和ASTm)。50例肝癌病人ASTm为14．8～132．2U／L，30例急性肝炎病人．ASTm为25．5～310．7U／L，20例心肌梗死病人ASTm为20．8～146．7U／L。结论:建立谷氮酸脱氢酶偶联显色法在全自动电泳仪上检测，操作简便，敏感度高。电泳后区带清晰、紧密。ASTm同工酶的活力来自细胞线粒体，因此对ASTm同工酶的检测可了解肝细胞、心脏细胞超微结构损伤的程度，同时估价其预后和对病程的监护也具有一定临床意义。