载辛伐他汀β-磷酸三钙支架复合脂肪干细胞修复兔颅骨缺损

目的：应用辛伐他汀(simvastatin)作用于脂肪干细胞，研究其对细胞生长、成骨、成血管分化的影响；利用β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate，β-TCP)三维支架材料负载辛伐他汀，与脂肪干细胞复合，构建组织工程骨，用于兔颅骨缺损模型的修复。方法：原代培养兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells, rASCs)，分别以含0、0.01、0.1和1 μmol/L辛伐他汀的培养液培养，计数法检测细胞数目；以0、0.05、0.1 μmol/L浓度辛伐他汀培养ASCs，1、7 d后，实时定量PCR检测成骨、成血管基因的表达(RUNX2、OPN、OCN、VEGF)； 7 d后行ALP染色；14 d后行茜素红染色。12只新西兰大白兔颅顶双侧8 mm缺损，分别以4组材料修复(A: β-TCP，B: β-TCP/Cell，C: β-TCP/Sim，D: β-TCP/Cell/Sim)，每组6例，植入8 周后取材，进行组织学观察。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：0.05 μmol/L辛伐他汀对脂肪干细胞RUNX2、OCN、OPN和VEGF等成骨、成血管基因的表达具有明显促进作用，碱性磷酸酶染色和von Kossa染色更为明显；植入体内8周后，β-TCP/Cell/Sim组材料的成骨面积显著大于其他3组。结论：0.05 μmol/L辛伐他汀在体外对ASCs具有明显的促成骨作用，载辛伐他汀β-TCP复合脂肪干细胞可促进兔颅骨缺损的修复。