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| Ⅱ型单纯疱疹病毒培养及gG-2基因特异片段的克隆 | |
| 引用本文： | 高建,黄宇烽,曹晶,王浩洋,陆金春. Ⅱ型单纯疱疹病毒培养及gG-2基因特异片段的克隆[J]. 中华男科学杂志, 2009, 15(3): 223-227 |
| 作者姓名： | 高建 黄宇烽 曹晶 王浩洋 陆金春 |
| 作者单位： | 1. 南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210046;南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,210002 2. 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,210002 3. 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,210002;南京医科大学基础医学院微生物与免疫学系,江苏,南京,210029 4. 南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,江苏,南京,210002;武警江苏总队医院南京分院检验科,江苏,南京,210028 |
| 摘 要： | 目的:通过培养和扩增Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)并提取其全基因组,从而克隆包膜糖蛋白gG-2全长基因及其保守性较高、抗原性较强的特异片段。方法:将HSV-2病毒感染Hela细胞获得大量病毒液,用酚-氯仿法提取病毒全长基因组,并以此为模板扩增编码gG-2的US4基因,再根据氨基酸序列比对结果,选取其特异片段,设计带酶切位点的引物克隆gG-2基因特异片段。结果:成功地获得了大量HSV-2病毒液并提取了病毒基因组,克隆了gG-2全长基因以及特异片段,测序证实,两者均与GenBank中报道的序列相一致。结论:对于遗传特性相对稳定的HSV-2来说,通过病毒感染细胞的方法短时期内获得大量病毒液,并从病毒全基因组中克隆gG-2特异基因片段的方法是可行的,从而为进一步构建gG-2特异片段相关载体、表达相应蛋白奠定了基础。 |
| 关 键 词： | Ⅱ型单纯疱疹病毒 gG-2 病毒感染 |
Culture of HSV-2 and Cloning of Specific Fragment of the gG-2 Gene |
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| GAO Jian,HUANG Yu-feng,CAO Jing,WANG Hao-yang,LU Jin-chun. Culture of HSV-2 and Cloning of Specific Fragment of the gG-2 Gene[J]. National journal of andrology, 2009, 15(3): 223-227 | |
| Authors: | GAO Jian HUANG Yu-feng CAO Jing WANG Hao-yang LU Jin-chun |
| Affiliation: | GAO Jian1,2,HUANG Yu-feng2,CAO Jing2,3,WANG Hao-yang2,LU Jin-chun2,4 1.Institute of Life Science,Nanjing Normal University,Nanjing,Jiangsu 210046,China,2.PLA Institute of Clinical Laboratory Medicine,Nanjing General Hospital of Nanjing Military Region,Jiangsu 210002,3.Department of Immunology,School of Preclinical Medicine,Nanjing Medical University,Jiangsu 210029,4.Department of Laboratory Science,Nanjing Hospital of Jiangsu Corps of the Armed Police Force,Jiangsu 210028... |
| Abstract: | Objective:To clone the glycoprotein G gene and its specific fragment with high conservation and antigenicity by culturing and amplifying herpes simplex virus type 2 and extracting its whole genome.Methods:We obtained a great deal of suspension with HSV-2 virus after infecting the cultured Hela cells with HSV-2 virus,extracted the whole genome of the virus by the phenol-chloroform method,and amplified the US4 gene coding gG-2 by PCR.Then we selected the specific target fragment according to the amino acid se... |
| Keywords: | gG-2 |
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