人外周血γδ T细胞的可溶性anti-TCRγδ抗体扩增及其培养和保存的条件 |
| |
引用本文: | 康 宁,崔 瑛,周建华,刘庆丰,崔莲仙,巴德年,何 维.人外周血γδ T细胞的可溶性anti-TCRγδ抗体扩增及其培养和保存的条件[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2009,16(2):106-112. |
| |
作者姓名: | 康 宁 崔 瑛 周建华 刘庆丰 崔莲仙 巴德年 何 维 |
| |
作者单位: | 中国医学科学院,基础医学研究所,北京协和医学院基础学院,免疫学系,北京,100005 |
| |
基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(No. 2007AA021109) |
| |
摘 要: | 目的:比较人外周血γδ T细胞不同的制备方法,摸索适于临床应用的培养和保存条件。方法:分离人外周血单个核细胞,分别以固相化和可溶性antiTCRγδ抗体进行刺激,以添加小牛血清或人AB血浆的RPMI 1640培养液或AIM V无血清培养液进行培养,采用锥虫蓝染色法检测γδ T细胞存活率,采用免疫荧光染色法考察γδ T细胞的纯度和亚型,采用乳酸脱氢酶(lacate dehydrogenase,LDH)法检测γδ T细胞对不同肿瘤细胞系的杀伤作用。结果:添加15%小牛血清和添加5%人AB血浆的RPMI 1640培养液对γδ T细胞的培养效果接近,均优于AIM V无血清培养液。可溶性抗体与固相化抗体扩增外周血γδ T细胞的效果相似;可溶性抗体扩增的γδ T细胞受体(T cell receptor,TCR)库容完整,同时具有TCR Vδ1和Vδ2两种亚型;对肺癌、肝癌和卵巢癌细胞系均有体外杀伤活性。这些γδ T细胞在含1%人AB血浆或0.25%人血白蛋白的生理盐水中、4 ℃条件下保存12 h,细胞存活率仍达95%以上。结论:可溶性antiTCR γδ抗体和含有人AB血浆的RPMI 1640培养液可以用于人外周血γδ T细胞的体外扩增,扩增得到的γδ T细胞在含有血浆或白蛋白的生理盐水中稳定性较好。
|
关 键 词: | γδ T细胞 可溶性抗体 培养液 稳定性 |
收稿时间: | 2/4/2009 12:00:00 AM |
修稿时间: | 2009/3/11 0:00:00 |
本文献已被 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《中国肿瘤生物治疗杂志》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《中国肿瘤生物治疗杂志》下载免费的PDF全文 |
|