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PCR技术在快速筛选DNA文库中的应用
引用本文:赵永祥,刘斌,张昊宇,胡冬煦,杨进福,夏家辉,潘乾,薛志刚. PCR技术在快速筛选DNA文库中的应用[J]. 中国医学工程, 2004, 12(4): 48-51
作者姓名:赵永祥  刘斌  张昊宇  胡冬煦  杨进福  夏家辉  潘乾  薛志刚
作者单位:1. 中南大学湘雅三医院,心胸外科,湖南,长沙,410013;中南大学湘雅移植医学研究院,湖南,长沙,410013
2. 中南大学湘雅三医院,心胸外科,湖南,长沙,410013
3. 中南大学湘雅二医院,心胸外科,湖南,长沙,410011
4. 中国医学遗传学国家重点实验室,湖南,长沙,410078
基金项目:国家自然科学基金,国家"211"工程建设项目,卫生部科研项目,美国中华医学会资助项目
摘    要:目的探讨运用PCR(polymerase chain reaction)方法快速筛选DNA文库的可行性.方法以猪α-1,3GT cDNA片段为探针,用cDNA上的特异性序列合成的引物,采用噬菌斑原位杂交和PCR相结合的方法,对猪的gDNA文库进行α-1,3GT基因筛选,经酶切、Southern Blot、测序和荧光原位杂交定位.结果经过两次杂交和一次PCR即得信号很强的7个阳性单克隆,插入子均在8kb以上,且包含第三内含子,其中3个片段测序证实含第三、第四外显子;荧光原位杂交证实该基因位于染色体1q2.10-q2.11.结论PCR可以应用于快速筛选DNA文库.

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文章编号:1672-2019(2004)04-0048-04
修稿时间:2004-03-12

Application of PCR in quickly screening DNA library
ZHAO Yong-xiang,LIU Bin,ZHANG Hao-yu,HU Dong-xu,YANG Jin-fu,XIA Jia-hui,PAN Qian,XUE Zhi-gang. Application of PCR in quickly screening DNA library[J]. China Medical Engineering, 2004, 12(4): 48-51
Authors:ZHAO Yong-xiang  LIU Bin  ZHANG Hao-yu  HU Dong-xu  YANG Jin-fu  XIA Jia-hui  PAN Qian  XUE Zhi-gang
Affiliation:ZHAO Yong-xiang1,4,LIU Bin1,4,ZHANG Hao-yu1,HU Dong-xu2,YANG Jin-fu2,XIA Jia-hui3,PAN Qian3,XUE Zhi-gang3
Abstract:
Keywords:DNA  PCR
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