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DOC-2作用蛋白的筛选及与TGFβⅢ受体相互作用的初步验证
引用本文:刘淑娟,韩军涛,王涛,任睿. DOC-2作用蛋白的筛选及与TGFβⅢ受体相互作用的初步验证[J]. 中国癌症杂志, 2007, 17(12): 909-913
作者姓名:刘淑娟  韩军涛  王涛  任睿
作者单位:1. 西安第四军医大学西京医院妇产科,烧伤外科,陕西,西安,710032
2. 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032
摘    要:背景与目的:人卵巢癌差异表达基因DOC-2既是肿瘤抑制基因也是信号分子,参与细胞的生长分化过程。筛选DOC-2氨基端磷酸酪氨酸作用结构域PID(nDOC-2)的相互作用蛋白并进行初步验证,为研究DOC-2的信号通路提供线索。方法:将含有人DOC-2氨基端PID结构域cDNA的片断插入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母菌AHl09并在其内表达,然后转化人胎脑cDNA文库,在营养缺陷培养基和X-d-半乳糖苷酶(X—d—gal)上进行阳性克隆的双重筛选,PCR扩增目的片段,测序,并进行生物学分析,寻找DOC-2氨基端PID结构域的相互作用蛋白。将DOC-2cDNA和TGFβⅢ受体cDNA共转染人卵巢癌细胞系HO-8910,利用免疫沉淀和Western Blot,对TGFβⅢ型受体是否能与DOC-2相互作用进行初步分析。结果:经扩增和筛选胎脑cDNA文库及序列分析,21个侯选阳性克隆中3个克隆为:APLPl、TGFβⅢ型受体的部分mRNA和PCDHGC3(pmtocadherin gamma subfamily C3)。免疫沉淀及Westernblot结果显示,DOC-2与TGFβⅢ型受体相互作用后可形成蛋白复合物。结论:获得的3个基因编码的蛋白可能参与了DOC-2的信号转导,DOC-2与TGFβⅢ型受体可能存在互相作用,并通过TGFβⅢ型受体在TGFβ的信号通路中起作用。

关 键 词:人DOC-2基因  PID结构域  TGFβ信号通路
文章编号:1007-3639(2007)12-0909-05
收稿时间:2007-08-24
修稿时间:2007-10-29

Screening of DOC-2 interactive proteins and identification of the interaction between DOC-2 and TGFβⅢ receptor
LIU Shu-juan,HAN Jun-tao,WANG Tao,REN Rui. Screening of DOC-2 interactive proteins and identification of the interaction between DOC-2 and TGFβⅢ receptor[J]. China Oncology, 2007, 17(12): 909-913
Authors:LIU Shu-juan  HAN Jun-tao  WANG Tao  REN Rui
Abstract:
Keywords:
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