| 重组人HER2/neu ICD在毕赤酵母中的表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 徐煌,韩冬,董波,关铭,颜炜群. 重组人HER2/neu ICD在毕赤酵母中的表达及鉴定[J]. 中国老年学杂志, 2008, 28(24): 2403-2405 |
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| 作者姓名： | 徐煌 韩冬 董波 关铭 颜炜群 |
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| 作者单位： | 1. 嘉兴学院医学院,浙江,嘉兴,314001
2. 吉林大学药学院 |
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| 摘 要： | 目的 用毕赤酵母表达体系制备具有与天然HER2/neu ICD相同结构和活性的重组HER2/neu ICD.方法 PCR法自质粒pCMV中克隆HER2/neu ICD基因,构建真核表达载体pPICZα/HER2/neu ICD,电转化至毕赤酵母菌株X-33.对基因转染Zeocin抗性阳性的克隆,采用PCR法筛选出稳定表达HER2/neu ICD的菌株.最后用SDS-PAGE鉴定甲醇诱导的培养上清液中的HER2/neu ICD.结果 构建pPICZα/HER2/neu ICD真核表达载体并经电转化获得Zeocin抗性阳性的克隆;PCR法筛选了稳定表达HER2/neu ICD的菌株;SDS-PAGE分析显示甲醇诱导后表达上清中含有HER2/neu ICD,分子量约为84 kDa.结论 成功构建pPICZα/HER2/neu ICD真核表达载体并筛选出稳定表达HER2/neu ICD的毕赤酵母工程菌.
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| 关 键 词： | HER2/neu胞内区 基因表达 毕赤酵母 |
The expression of recombinant human HER2/neu ICD in Pichia and its identification |
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