体外活化CD8~+ NKT细胞的肿瘤杀伤作用

目的:探讨超抗原SEB活化并扩增的耐受调节性CD8+ NKT细胞对肿瘤细胞K562和A549的杀伤作用。方法:获取体外扩增0、10、20、30 d的耐受调节性效应细胞与K562和A549肿瘤细胞做混合淋巴细胞培养,MTT方法测定效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。经荧光抗体染色、流式细胞术(FCM)解析效应细胞表面CD69分子的表达率和NKT细胞亚群百分数。结果:在效靶比20∶1时,效应细胞杀伤K562和A549细胞的百分率分别达到75.4%和67.2%(P0.05,n=3)。效应细胞的上清液未显示杀伤作用。效应细胞表面CD69分子的表达率随培养时间延长而增加,由0 d的0.11%增加到30 d的98.23%(P0.01,n=3)。效应细胞中CD8+ NKT细胞亚群随扩增时间延长而增加,由正常值(0 d)的0.36%增加到30 d的41.59%(P0.05,n=3)。结论:耐受调节性CD8+ NKT细胞在杀伤肿瘤细胞中起了重要作用。杀伤肿瘤细胞的作用机制是效应细胞的直接作用,与游离的细胞因子无关。