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人高迁移率族B1的表达及其多克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:邢效如,杨朝辉,郑英如,胡大强,黄刚,龚薇,何凤田,李蓉芬.人高迁移率族B1的表达及其多克隆抗体的制备与鉴定[J].免疫学杂志,2005,21(4):323-326.
作者姓名:邢效如  杨朝辉  郑英如  胡大强  黄刚  龚薇  何凤田  李蓉芬
作者单位:第三军医大学,生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038;大坪医院妇产科,重庆,400042
摘    要:目的以原核表达的人高迁移率族B1(High mobihty group box 1,HMGB1)蛋白为免疫原免疫日本大耳白兔,制备其兔多克隆抗体并进行鉴定。方法将人HMGB1 cDNA克隆于原核表达载体pQE-80L并转化大肠杆菌DH5α,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导HMGB1表达,Ni^2 -NTA层析纯化后,用其免疫兔。以ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性。结果成功表达并纯化了人HMGB1蛋白,纯化后纯度可达96%;ELISA法测定抗体效价为1:25600;Western blot结果显示所制备的抗体可特异性与人HMGB1蛋白结合。结论成功制备了兔抗人HMGB1多克隆抗体,为进一步研究HMGB1与相关疾病的关系打下了基础。

关 键 词:人HMGB1  原核表达  多克隆抗体
文章编号:1000-8861(2005)04-0323-04
修稿时间:2005年3月14日

Expression of human HMGB1 and preparation of anti-human HMGB1 polyclonal antibody
XING Xiao-ru,YANG Zhao-hui,ZHENG Ying-ru,Hu Da-qiang,HUANG Gang,GONG Wei,HE Feng-Tian,LI Rong-Fen.Expression of human HMGB1 and preparation of anti-human HMGB1 polyclonal antibody[J].Immunological Journal,2005,21(4):323-326.
Authors:XING Xiao-ru  YANG Zhao-hui  ZHENG Ying-ru  Hu Da-qiang  HUANG Gang  GONG Wei  HE Feng-Tian  LI Rong-Fen
Abstract:
Keywords:Human HMGB1  Prokaryotic expression  Polyclonal antibody
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