| 一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法 |
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| 引用本文： | 张惠丹,任辉,王晓楠,方瑾. 一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法[J]. 临床与实验病理学杂志, 2010, 26(5) |
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| 作者姓名： | 张惠丹 任辉 王晓楠 方瑾 |
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| 作者单位： | 1. 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室、医学细胞生物学教育部重点实验室、细胞生物学教研室,沈阳,110001
2. 沈阳市肛肠医院大肠外科,沈阳,110002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，辽宁省教育厅高等学校重点实验室项目，辽宁省教育厅青年基金 |
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| 摘 要： | 目的建立从甲醛固定石蜡包埋组织中高效、快速提取基因组DNA的方法。方法将一片10μm厚石蜡包埋大肠癌组织切片直接浸入150μl消化液中,56℃孵育0.5h、1h和2h,灭活蛋白酶K后离心取上清即为DNA提取物。琼脂糖凝胶电泳检测所提取DNA的片段分布,紫外分光光度法测定DNA的产量及纯度。以提取的DNA为模板,PCR扩增不同长度产物片段并进行产物的直接测序以评价提取方法。结果该提取方法能够获得较长片段的基因组DNA,从一片10μm厚石蜡切片中即可获得大约60μg的DNA,在0.5h消化条件下获取的模板DNA,即可实现对152bp、293bp、392bp和541bp等4种不同片段的100%扩增,1h消化组的PCR产物可直接用于DNA测序。结论建立了一种简单、快速地从甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法,只需一步消化即可获得满足普通PCR及测序需要的基因组DNA。
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| 关 键 词： | 甲醛固定 石蜡包埋组织 DNA提取 聚合酶链式反应(PCR) |
A method for rapid DNA extraction from formalin-fixed paraffin-embedded tissues |
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| ZHANG Hui-dan,REN Hui,WANG Xiao-nan,FANG Jin. A method for rapid DNA extraction from formalin-fixed paraffin-embedded tissues[J]. Chinese Journal of Clinical and Experimental Pathology, 2010, 26(5) |
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| Authors: | ZHANG Hui-dan REN Hui WANG Xiao-nan FANG Jin |
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