核基质MINT C端片段(2226-2959)相互作用分子的筛选与鉴定 |
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引用本文: | 李军锋,周鹏,秦红,韩骅. 核基质MINT C端片段(2226-2959)相互作用分子的筛选与鉴定[J]. 医学争鸣, 2003, 24(24): 2220-2223 |
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作者姓名: | 李军锋 周鹏 秦红 韩骅 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室,陕西,西安,710033 2. 第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室,陕西,西安,710033;唐都医院干细胞医学中心,陕西,西安,710033 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划),30200148,001CB509906,, |
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摘 要: | 目的:为了研究MINT的功能及其转录抑制的机制,筛选与MINT相互作用的蛋白.方法:以MINT第2226-2959氨基酸(F5为诱饵,用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎9 d的cDNA文库.用诱饵质粒和文库先后转化酵母宿主后,对4.5×106个酵母克隆进行了营养筛选和α-半乳糖苷酶筛选,获得51个阳性克隆.从中提取质粒进行酶切鉴定,获得10个非重复克隆,对此10个克隆进行序列分析.结果:筛选到的3个基因分别为MINT,α-晶状体蛋白结合蛋白1(A1phaA-CRYBP1)和核受体辅抑制因子1(N-CoR1).在酵母中分析了N-CoR1与MINT的作用区段,N-CoR1与MINT的2226-2959和2960-3576两个片段均有相互作用.结论:①MINT在细胞内可能形成二聚或多聚体;②除了RBP-J和MSX2外,MINT还可能调节AlphaA-CRYBP1的活性;③MINT可能通过N-CoR1募集组蛋白去乙酰化酶(HDAC)进行转录抑制.
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关 键 词: | MINT MSX2 N-CoR1 酵母菌杂交 |
文章编号: | 1000-2790(2003)24-2220-04 |
修稿时间: | 2003-09-10 |
Screening and identification of molecules interacting with nuclear matrix protein MINT C-terminal (2226-2959) |
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Abstract: | |
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Keywords: | MINT MSX2 N CoR1 yeasts hybridization |
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