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| Gab2对人肺癌细胞A549侵袭能力影响及其机制的探讨 | |
| 引用本文： | 史立宏,陶蓉,王云甲,张秀荣,孙秀宁,周风华,罗荣城,张宝刚.Gab2对人肺癌细胞A549侵袭能力影响及其机制的探讨[J].中华肿瘤防治杂志,2013,20(16):1207-1211. |
| 作者姓名： | 史立宏 陶蓉 王云甲 张秀荣 孙秀宁 周风华 罗荣城 张宝刚 |
| 作者单位： | 1. 潍坊医学院山东省应用药理学重点实验室,山东潍坊261053;南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州510515 2. 潍坊医学院,山东潍坊,261053 3. 潍坊医学院山东省应用药理学重点实验室,山东潍坊,261053 4. 潍坊医学院病原微生物学教研室,山东潍坊,261053 5. 潍坊医学院病理学教研室,山东潍坊,261053 6. 南方医科大学南方医院肿瘤中心,广东广州,510515 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，山东省中青年科学家科研奖励基金，山东省教育厅高等学校优秀青年教师国内访问项目，潍坊市科学技术发展计划 |
| 摘 要： | 目的:探讨Grb2协同结合蛋白2(Grb2binding protein-2,Gab2)对人肺癌A549细胞体外迁移和侵袭的影响及其机制。方法:将质粒pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-Gab2#1、pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-Gab2#2和对照空载质粒转染到A549细胞中,建立Gab2低表达的siGab2/A549#1、siGab2/A549#2细胞和对照SCR/A549细胞。应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测小分子干扰RNA(siRNA)干扰Gab2表达后的基因和蛋白表达水平。趋化运动实验检测细胞的迁移能力;体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力;蛋白质印迹法检测siRNA干扰Gab2表达后,A549细胞在胰岛素样生长因子-1(insulinlike growth factor-1,IGF-1)刺激下基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metal-loproteinase-9,MMP-9)的表达及磷酸化Akt(pAkt)、磷酸化人雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamy-cin,pmTOR)的活化情况。结果:siRNA干扰Gab2表达后,RT-PCR测定A549细胞Gab2mRNA相对表达量为1.340±0.009,Scr/A549细胞为1.201±0.074,siGab2#1/A549细胞为0.315±0.008,siGab2#2/A549细胞为0.289±0.007。蛋白印迹法检测A549细胞Gab2蛋白表达量为0.205±0.003,Scr/A549细胞为0.241±0.004,siGab2#1/A549细胞为0.128±0.002,siGab2#2/A549细胞为0.066±0.001。siGab2#2/A549细胞与A549细胞比较Gab2基因表达显著降低,t=168.032,P<0.001;Gab2蛋白表达也显著降低,t=64.352,P<0.001。siGab2#2/A549细胞的体外迁移和侵袭能力明显低于SCR/A549细胞,t值分别为5.101和10.812,P值分别为0.029和0.002。在IGF-1刺激下,siGab2/A549细胞的MMP-2、MMP-9蛋白的表达量不再有明显变化,t值分别为-2.051和-2.652,P值分别为0.054和0.064。siGab2/A549细胞中pAkt、pmTOR的活化也显著抑制。结论:Gab2可能通过调节Akt/mTOR信号通路,促进A549细胞的侵袭能力。 |
| 关 键 词： | Gab2 肺肿瘤 A549细胞 侵袭 |
Role and mechanism of Gab2 in invasion of human lung cancer A549 cells |
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| SHI Li-hong,TAO Rong,WANG Yun-jia,ZHANG Xiu-rong,SUN Xiu-ning,ZHOU Feng-hua,LUO Rong-cheng,ZHANG Bao-gang.Role and mechanism of Gab2 in invasion of human lung cancer A549 cells[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2013,20(16):1207-1211. | |
| Authors: | SHI Li-hong TAO Rong WANG Yun-jia ZHANG Xiu-rong SUN Xiu-ning ZHOU Feng-hua LUO Rong-cheng ZHANG Bao-gang |
| Institution: | 1.Weifang Medicial College,Weifang 261053,P.R.China 2.Center of Oncology,Nanfang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510515,P.R.China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Gab2 lung cancer A549cell invasion |
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