| Neuritin蛋白的纯化及其对PC12细胞和鸡胚DRG神经元生长的影响 |
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| 引用本文： | 张树军,赵 臣,黄凤兰,仙玲玲,于 娜,杨 磊,黄 瑾.Neuritin蛋白的纯化及其对PC12细胞和鸡胚DRG神经元生长的影响[J].神经解剖学杂志,2014(2):94-98. |
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| 作者姓名： | 张树军 赵 臣 黄凤兰 仙玲玲 于 娜 杨 磊 黄 瑾 |
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| 作者单位： | ;1.内蒙古民族大学生命科学学院;2.内蒙古大学;3.包头北方医院普外科;4.石河子大学医学院 |
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| 摘 要： | 目的:纯化毕赤酵母表达的Neuritin蛋白,通过观察其对PC12细胞和鸡胚背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)的作用,研究其神经生物学功能。方法:采用镍离子金属螯合亲和层析法纯化Neuritin蛋白,Bradford法对纯化的Neuritin蛋白进行定量,然后加入到PC12细胞和DRG的培养液中,通过观察PC12细胞突起的生长情况和细胞形态的变化,研究其促进细胞突起生长的功能;通过观察鸡胚DRG的神经纤维生长情况,研究其促进DRG神经纤维生长活性;通过观察鸡胚背根神经节的裂解时间,研究其阻止细胞退化和凋亡的活性。结果:纯化后的Neuritin蛋白经SDS-PAGE电泳显示,获得11 kDa左右的唯一蛋白条带,即Neuritin蛋白;Bradford定量法计算出其浓度为490μg/ml。纯化的Neuritin蛋白加入到PC12细胞培养液中,PC12细胞长出突起,发生类神经元样改变;鸡胚DRG培养液中加入Neuritin蛋白后,长出神经纤维,裂解时间也延长,并与浓度呈正相关。结论:毕赤酵母表达的Neuritin蛋白得到有效纯化,纯化的Neuritin蛋白能促进细胞突起的生长,阻止细胞的退化和凋亡,延长细胞的存活时间,这为进一步研究neuritin的功能及作用机制奠定了良好的实验基础。
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| 关 键 词： | neuritin 毕赤酵母 鸡胚背根神经节 PC12细胞 |
Purification of neuritin protein and its effects on the cell growth of PC12 cells and chicken embryonic DRG neurons |
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