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RASSF1A表达或缺失的两类早期肺腺癌组织差显蛋白的筛选与鉴定
引用本文:刘桂芝,吴逸明. RASSF1A表达或缺失的两类早期肺腺癌组织差显蛋白的筛选与鉴定[J]. 第二军医大学学报, 2008, 29(2): 0136-0141
作者姓名:刘桂芝  吴逸明
作者单位:郑州大学第一附属医院体检科,郑州,450052;郑州大学公共卫生学院劳动卫生与毒理学教研室,郑州,450052
摘    要:目的:建立RASSFlA表达或表达缺失的两类不同早期肺腺癌组织蛋白质的双向电泳凝胶图谱.筛选并鉴定存在明显表达差异的蛋白质.方法:采用Western印迹技术,从RASSFlA转录缺失和RASSFIA转录正常的早期肺腺癌标本中筛选出RASSFlA表达和表达沉默的癌组织各5例.提取组织可溶性总蛋白,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离总蛋白,建立两类不同早期肺腺癌组织蛋白质的双向电泳凝胶图谱;PDQuest凝胶图像分析软件比较分析,筛选出差异表达的蛋白质点;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱获得相应蛋白质点的肽质量指纹图谱;搜索蛋白质数据库鉴定差异表达的蛋白质.结果:建立了重复性较好的RASSFIA表达或表达缺失的两类不同早期肺腺癌组织蛋白质双向电泳凝胶图谱;筛选出存在明显表达差异的蛋白质点17个,挖取其中的9个进行质谱分析,9个蛋白质点均得到了满意的肽质量指纹图谱;搜索蛋白质数据库鉴定出5种蛋白质,分别是:细胞色素b5(cytochrome b5),60S磷酸核楮体蛋白P2(60S acidic ribosomal protein P2),碳酸酐酶1(carbonic anhydrase-1),5-吡咯啉羧酸还原酶1(pyrroline-5-carboxylate reductase-1)和载脂蛋白A-I前体蛋白(apolipoprorein A-I precursor).结论:成功建立了RASSFlA表达或表达缺失的两类不同早期肺腺癌组织蛋白质的双向电泳凝胶图谱,从中鉴定出5种存在明显表达差异的蛋白质,为进一步研究RASSFIA作用的信号转导途径奠定了初步的基础.

关 键 词:肺肿瘤  腺癌  RASSFl蛋白  蛋白质组学  双向凝胶电泳  基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
文章编号:0258-879X(2008)02-0136-06
收稿时间:2007-10-31
修稿时间:2007-10-31

Screen and identification of differential proteins in two early stage lung adenocarcinoma tissues with and without RASSF1A expression
LIU Gui-zhi and WU Yi-ming. Screen and identification of differential proteins in two early stage lung adenocarcinoma tissues with and without RASSF1A expression[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2008, 29(2): 0136-0141
Authors:LIU Gui-zhi and WU Yi-ming
Affiliation:1. Department of Physical Examination, the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China and 2. Department of Occupational Health and Toxicology, College of Public Health, Zhengzhou University, Zhengzhou 450052
Abstract:
Keywords:lung neoplasms   adenocarcinoma   RASSF1 protein   proteomics   two dimensional gel electrophoresis   matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry
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