| 人HSP 40基因真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 范国华,陈生弟,杨卉,戚辰,李琳,巴茂文.人HSP 40基因真核表达载体的构建及表达[J].上海交通大学学报(医学版),2006,26(1):54-58. |
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| 作者姓名： | 范国华 陈生弟 杨卉 戚辰 李琳 巴茂文 |
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| 作者单位： | [1]上海交通大学医学院瑞金医院神经内科,上海200025 [2]上海交通大学医学院神经病学研究所,上海200025 |
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| 基金项目： | 科技部科研项目;中国科学院资助项目;上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划 |
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| 摘 要： | 目的 构建人热休克蛋白40（HSP40）的2种同源物HDJ-1和HDJ-2基因真核表达载体，观察其在人成神经细胞瘤细胞株（SK-N-SH）中的表达。方法 从流产胚胎脑组织中抽提总RNA，RT-PCR扩增HDJ-1和HDJ-2 cDNA，经限制性内切酶双酶切后，克隆至真核表达载体pcDNA3．1（＋）和pEGFP-N1质粒中。HDJ-1和HDJ-2基因测序结果与基因库登录序列比对，序列正确的重组质粒用脂质体转染SK-N-SH细胞，Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果 HDJ-1和HDJ-2基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Westernblot证实pcDNA3．1（＋）／HDJ-1转染SK-N-SH细胞24h后有HDJ-1的过表达，至少持续72h；pEGFP-N1／HDJ-1和pEGFP-N1／HDJ-2转染的细胞有HDJ-1／GFP和HDJ-2／GFP融合蛋白的表达，至少持续72h。荧光显微镜观察到pEGFP-N1／HDJ-1和pEGFP-N1／HDJ-2转染的细胞中有绿色荧光蛋白的表达。结论 本实验成功构建pcDNA3．1（＋）／HDJ-1、pEGFP-N1／HDJ-1和pEGFP-N1／HDJ-2真核表达质粒，并在SK-N-SH细胞中表达。
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| 关 键 词： | HDJ-1 HDJ-2 pcDNA3.1( )质粒 pEGFP-N1质粒 转染 |
| 文章编号： | 0258-5898(2006)01-0054-05 |
| 收稿时间： | 2005-06-09 |
| 修稿时间： | 2005年6月9日 |
Construction of Human HSP 40 Eukaryotic Expression Vectors and Their Expression |
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| FAN Guo-hua,CHEN Sheng-di,YANG Hui,QI Chen,LI Ling,BA Mao-wen.Construction of Human HSP 40 Eukaryotic Expression Vectors and Their Expression[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2006,26(1):54-58. |
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| Authors: | FAN Guo-hua CHEN Sheng-di YANG Hui QI Chen LI Ling BA Mao-wen |
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| Institution: | 1. Department of Neurology, Ruijin Hospital, 2. Institute of Neurology, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HDJ-1 HDJ-2 pcDNA3 1( ) plasmid pEGFP-N1 plasmid transfect |
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