| 摘 要： | 目的 细胞凋亡是细胞死亡的一种形式，是积极主动的生理过程，是在基因调控下细胞的主动死亡。利用文献报道的原位末端标记和原位杂交方法检测骨髓和其他含血细胞较多的组织中的细胞凋亡结果不理想。因此对两种方法进行改进。方法 LACA小鼠，随机分为0、2．5、4．0、5．5及7．0Gy5组。各组动物进行^60Coγ射线全身一次照射。照射后活杀取材，制作骨髓细胞涂片，采用(1)在已有的原位末端标记方法中将亲和素-辣根过氧化物酶(Avidln-HRP)改为碱性磷酸酶标记的抗生蛋白链菌素(AP-A)；显色剂由DAB改为坚固红。(2)在已有的原位杂交技术中将显色剂NBT和BC／P改为坚固红。结果 (1)改进后的原位末端标记方法显示凋亡的细胞核呈玫瑰红色；正常或未凋亡的细胞核呈浅蓝色，反差明显，背景清晰。(2)改进后的原位杂交显示bcl-2 mRNA阳性结果呈玫瑰红色，背景清晰，胞核复染呈浅蓝色，反差明显。结论 经改进后的原位末端标记和原位杂交技术阳性结果均呈玫瑰红色，胞核复染呈浅蓝色，反差明显，背景清晰。两种方法的改进，解决了长期不能使用原位末端标记和原位杂交技术进行骨髓细胞凋亡规律及调控研究的难题，为其提供了可靠的技术保障。两种方法联合应用于外周血和免疫器官包括脾脏、胸腺、淋巴结等含内源性过氧化物酶丰富的组织细胞凋亡及调控的研究取得了良好结果。因此，本方法值得从事含丰富过氧化物酶细胞如外周血细胞、骨髓造血细胞及免疫组织器官等凋亡及调控研究工作者推广应用。
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