| 人转录因子sp1在大肠杆菌中的表达与体外纯化 |
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| 引用本文： | 王琪炜,陈宝俊,强倩,李淑锋.人转录因子sp1在大肠杆菌中的表达与体外纯化[J].南京铁道医学院学报,2014(1):1-4. |
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| 作者姓名： | 王琪炜 陈宝俊 强倩 李淑锋 |
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| 作者单位： | [1]东南大学生命科学研究院,江苏南京210018 [2]南京大学医学院附属鼓楼医院心胸外科,江苏南京210008 [3]东南大学医学院生物化学与分子生物学系,江苏南京210009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（31070706） |
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| 摘 要： | 目的：在大肠杆菌中表达人源转录因子spl蛋白，并进行体外纯化。方法：首先将人源sp1真核表达质粒pCMV-sp1中的sp1 cDNA用限制性内切酶切开，连入原核表达质粒pET28b，构建原核表达重组质粒pET28b-sp1-699c；然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21（DE3）菌株，经IPTG诱导表达带His-Tag的融合蛋白His-sp1（88-786aa），通过包涵体的变复性和Ni-IDA亲和层析纯化后，SDS-PAGE鉴定纯化后的蛋白。结果：融合蛋白His-sp1在大肠杆菌内得到高效表达，纯化后可得到较高纯度的蛋白。结论：本研究获得了较高纯度的融合蛋白His-sp1，为进一步研究sp1蛋白对靶基因的转录调控奠定了基础。
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| 关 键 词： | sp1蛋白 转录因子 大肠杆菌 蛋白表达与纯化 |
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