| 旋毛虫Hsp70与Ts87融合蛋白的构建表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 孙靓,孙青,房磊,杨静,顾园,毕阔,诸欣平. 旋毛虫Hsp70与Ts87融合蛋白的构建表达及鉴定[J]. 寄生虫与医学昆虫学报, 2015, 0(1) |
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| 作者姓名： | 孙靓 孙青 房磊 杨静 顾园 毕阔 诸欣平 |
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| 作者单位： | 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室,北京,100069 |
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| 基金项目： | 国家传染病重大专项(No．2012ZX10004220-012)；北京市自然科学基金青年基金资助项目 |
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| 摘 要： | 本文构建并表达了旋毛虫热休克蛋白70（Ts－Hsp70）与排泄分泌抗原Ts87的融合蛋白，并对融合蛋白进行纯化和免疫学鉴定。本研究采用限制性内切酶EcoRⅠ酶切位点将目的基因Ts－Hsp70与Ts87相连接，插入pET28－a （＋）质粒，转入大肠埃希菌BL21（DE3）中诱导表达、纯化，获得的融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87用Western blot的方法鉴定。经PCR、酶切鉴定、测序分析，结果显示，目的基因片段大小为2721 bp，构建的重组质粒与预期相符。经IPTG诱导表达，通过镍离子柱层析纯化复性后得到可溶的融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87，其相对分子质量约为100 kDa； Western blot结果显示，该蛋白可被抗His标签单抗、 rTs－Hsp70免疫血清、 rTs87免疫血清识别。以上结果表明，本研究成功构建并表达了融合蛋白rTs－Hsp70－Ts87，为进一步研究rTs－Hsp70－Ts87的免疫保护性，开发新的有效抗旋毛虫病的疫苗奠定基础。
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| 关 键 词： | 旋毛虫 融合蛋白 热休克蛋白70 排泄分泌抗原 疫苗 |
EXPRESSION AND CHARACTERIZATION OF A FUSION PROTEIN TS-HSP70 AND TS87 OF TRICHINELLA SPIRALIS |
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| SUN Liang,SUN Qing,FANG Lei,YANG Jing,GU Yuan,BI Kuo,ZHU Xin-Ping. EXPRESSION AND CHARACTERIZATION OF A FUSION PROTEIN TS-HSP70 AND TS87 OF TRICHINELLA SPIRALIS[J]. Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica, 2015, 0(1) |
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| Authors: | SUN Liang SUN Qing FANG Lei YANG Jing GU Yuan BI Kuo ZHU Xin-Ping |
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| Keywords: | Trichinella spiralis Recombinant fusion protein Heat shock protein 70(HSP70) Excretory-secretory antigen Vaccine |
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