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靶向LASS2基因的小干扰RNA对人肝癌细胞侵袭能力的影响
引用本文:唐宁,游海燕,金洁,于彬,覃文新. 靶向LASS2基因的小干扰RNA对人肝癌细胞侵袭能力的影响[J]. 肿瘤, 2009, 29(5). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2009.05.001
作者姓名:唐宁  游海燕  金洁  于彬  覃文新
作者单位:1. 复旦大学上海医学院,上海,200032;上海交通大学肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室,上海,200032
2. 上海交通大学肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室,上海,200032
3. 江苏大学生命科学院,镇江,212013
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),上海市国际科技合作基金 
摘    要:目的:研究靶向人源性长寿保障基因2(homosapiens longevity assurance homologue 2,LASS 2)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肝癌细胞MHCC97-L体外侵袭能力的影响.方法:通过脂质体转染将靶向LASS2的siRNA转染MHCC97-L细胞,运用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)检测转染后LASS2 mRNA的表达,筛选有效的siRNA片段;运用 BCECF氢离子敏感荧光探针检测MHCC97-L细胞跨膜运输氢离子的功能;采用Western印迹法分析MHCC97-L细胞及上清液中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的表达情况;应用明胶酶谱法检测MHCC97-L细胞上清液中MMP-2的活性; Transwell法检测细胞体外侵袭能力.结果:筛选得到靶向LASS2的有效siRNA-1片段.MHCC97-L细胞转染LASS2 siRNA-1后,其跨膜运输氢离子的能力增强,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2蛋白的表达及分泌无明显变化,但分泌的MMP-2活性形式增加,与空白对照组和无关序列组比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);且细胞的体外侵袭能力明显高于无关序列组和空白对照组(P<0.05).结论:靶向LASS2的siRNA能有效下调其表达,并能提高MHCC97-L细胞在转染LASS2 siRNA后的体外侵袭能力.

关 键 词:肝肿瘤  RNA,小分子干扰  肿瘤浸润  基因,LASS2

Small interfering RNA targeting LASS2 gene enhances invasion capacity of hepatocellular carcinoma cells
TANG Ning,YOU Hai-yan,JIN Jie,YU Bin,QIN Wen-xin. Small interfering RNA targeting LASS2 gene enhances invasion capacity of hepatocellular carcinoma cells[J]. Tumor, 2009, 29(5). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2009.05.001
Authors:TANG Ning  YOU Hai-yan  JIN Jie  YU Bin  QIN Wen-xin
Abstract:
Keywords:
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