| 大肠埃希菌O157:H7环介导等温扩增可视化检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 吕恒,张锦海,陈凤娟,谭维国,顾海涛,王平,王长军.大肠埃希菌O157:H7环介导等温扩增可视化检测方法的建立[J].中国病原生物学杂志,2013(4):289-292,309. |
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| 作者姓名： | 吕恒 张锦海 陈凤娟 谭维国 顾海涛 王平 王长军 |
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| 作者单位： | 南京军区疾病预防控制中心 |
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| 基金项目： | 国家重大传染病专项课题(No.2013ZX10004-103、No.2013ZX10004-218);江苏省科级支撑计划(社会发展)项目(No.BE2012609);全军后勤科研“十二五”重大项目(No.AWS11C001、No.AWS11C009);南京军区重点课题(No.10Z038,11Z040) |
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| 摘 要： | 目的建立肠出血性大肠埃希菌O157︰H7环介导等温扩增(LAMP)可视化快速检测方法。方法针对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157︰H7编码脂多糖rfbE基因保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为LAMP扩增的指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据HNB的颜色变化进行结果判定,评价LAMP方法的特异性和灵敏性。结果建立的LAMP法对O157︰H7rfbE基因的最低检出限约为100copy/反应管,检测肠产毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)、肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)、宋内志贺菌、福氏志贺菌均为阴性。体系的扩增效率较高,可在40min内出结果。结论建立的基于颜色判定的EHEC O157︰H7LAMP检测方法具有特异、灵敏,设备要求简单等特点,适用于EHEC O157︰H7的快速检测。
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| 关 键 词： | 肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157︰H7 可视化检测 环介导等温扩增(LAMP) 羟基萘酚蓝(HNB) |
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