| 大肠杆菌L-门冬酰胺酶Ⅱ作为多肽呈现载体的可行性研究 |
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| 引用本文： | 林洁,黄永城,王学军,吴洁,刘景晶. 大肠杆菌L-门冬酰胺酶Ⅱ作为多肽呈现载体的可行性研究[J]. 药物生物技术, 2006, 13(3): 159-165 |
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| 作者姓名： | 林洁 黄永城 王学军 吴洁 刘景晶 |
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| 作者单位： | 中国药科大学,生命科学与技术学院,江苏,南京,210009 |
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| 摘 要： | 为了研究大肠杆菌L-H冬酰胺酶Ⅱ（Lasparaginasell，AnsB）能否作为多肽呈现载体。选取乙肝病毒表面抗原（HBSAg）preS2结构域的核心抗原表位区作为模型多肽，构建了两种表达载体pET28a-AnsB-preS2L和pET28a-AnsB-preS2C，分别转化至表达宿主菌E.coliBL-21，LB培养基（Kan^r）培养，乳糖诱导高效表达，通过渗透休克，DEAE 52-cellulose柱层析纯化获得了在AnsB C端融合有线状和环状模型多肽的嵌合酶AnsB-preS2L和AnsB-preS2C，两种嵌合酶分别保留了AnsB 81％、25％的催化活力，两者的pH稳定性均与AnsB相符。ELISA检测结果显示AnsB-preS2L与抗preS2抗体的结合能力较AnsB-preS2C强。证明AnsB确实能够作为一种表面呈现载体将线性外源多肽以融合表达的方式呈现在酶分子的表面，最终形成一种在每个亚基表面呈现有多肽的嵌合酶。最后，用富含带电序列的8肽（KRKRKKSR）替换核心抗原表位区作为模型多肽，进一步验证了AnsB作为多肽呈现载体的可行性和通用性。
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| 关 键 词： | L-门冬酰胺酶Ⅱ 嵌合酶 表面呈现 外源多肽 抗原表位 表位扫描 |
| 文章编号： | 1005-8915（2006）03-0159-07 |
| 收稿时间： | 2005-11-28 |
| 修稿时间： | 2005-11-282006-01-18 |
Study on the Possibility of Foreign Peptide Display on the Surface of Escherichia coli L-Asparaginase Ⅱ |
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| LIN Jie,HUANG Yong-chen,WANG Xue-jun,WU Jie,LIU Jing-jing. Study on the Possibility of Foreign Peptide Display on the Surface of Escherichia coli L-Asparaginase Ⅱ[J]. Pharmaceutical Biotechnology, 2006, 13(3): 159-165 |
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| Authors: | LIN Jie HUANG Yong-chen WANG Xue-jun WU Jie LIU Jing-jing |
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| Affiliation: | School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing 21009, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | L-asparaginase Chimeric enzyme Surface display Foreign peptide Antigen epitope Epitope mapping |
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