反义转化生长因子β1抑制Ⅲ度烫伤愈合中瘢痕形成的实验研究

背景：瘢痕的形成涉及多种因素，其中之一是转化生长因子β1(TGFβ1)的高表达，为达到抑制TGFβ1过度表达的目的，尝试用反义TGFβ1抑制瘢痕形成的方法，将基因治疗技术运用于临床医学。目的：探讨反义TGFβ1对Ⅲ度烫伤愈合中瘢痕生成的抑制作用。设计：随机对照、重复测量设计。地点和对象：在上海第二医科大学生物化学教研室完成。清洁级雄性SD大鼠105只，体质量(250&;#177;20)g，购于中科院上海实验动物中心。干预：SD大鼠Ⅲ度烫伤后，分3组进行处理：①反义TCFβ1脱氧寡核苷酸。②反义TGFβ1重组质粒。③空白对照。分别于烫伤后l，3，5，14dRT-PCR、免疫组化检测TGFβ1 mRNA和蛋白质的表达。烫伤后5，14，2l，28，60d原位杂交检测I型胶原mRNA的表达变化，病理检测炎性细胞浸润反应和胶原分布状况。主要观察指标：①烫伤后l，3，5，14dRT-PCR，TGFβ1 mRNA和蛋白质的表达。②烫伤后5，14，21，28，60dI型胶原mRNA的表达变化。③病理检测炎性细胞浸润反应和胶原分布状况。结果：反义ODN组和反义重组质粒组在烫伤后第1天TGFβ1 mRNA表达水平与对照组相比无降低，14d分别为0．176&;#177;0．014和0．213&;#177;0．071，表达均减少。反义作用组TGFβ1蛋白质的表达在烫伤后3周内均为低表达。原位杂交显示对照组在14dⅠ型胶原mRNA开始表达，28d达到高峰，随后减少，反义作用组无此现象，一直保持低表达。病理染色显示反义作用组炎性细胞浸润少，炎性反应低，胶原合成减少。结论：反义TGFβ1可抑制Ⅲ度烫伤愈合中瘢痕的形成。