灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌株CA23的协同抑菌作用

目的 探讨灯台叶总碱与氟康唑联用对耐药白念珠菌CA23毒力因子的作用和潜在机制。方法 微量稀释法、棋盘法及时间-杀菌曲线测定灯台叶总碱与氟康唑联用效果；荧光探针测定菌株外排泵功能，实时荧光定量PCR法检测耐药相关基因表达；倒置显微镜、扫描电镜观察菌丝诱导培养基中菌株形态转换，RT-qPCR法检测菌丝相关基因表达，添加外源性cAMP验证；卵黄琼脂平板法检测菌株胞外磷脂酶活性。结果 灯台叶总碱与氟康唑对耐药白念珠菌具有较强的协同抑菌作用；联用处理并不能显著抑制菌株的外排功能，与耐药相关基因表达结果一致；两药联用可以抑制在SD和Spider诱导培养基中菌丝生长，且下调菌丝相关基因CYR1、ALS3、RAS1、BCR1、ALS2、TPK2表达，添加外源性cAMP后，能恢复部分药物联用引起的菌株形态变化；两药联用能抑制胞外磷脂酶活性，且对灯台叶总碱存在剂量依赖性。结论 灯台叶总碱与氟康唑联用对氟康唑耐药株表现为协同抑菌作用，其机制与调节Ras1-cAMP-PKA信号通路抑制菌丝生长，并降低胞外磷脂酶活性从而影响耐药白念珠菌毒力因子有关。