| SARS-CoV-2核衣壳蛋白的生物信息学分析、纯化及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 王巧,陈芝喜. SARS-CoV-2核衣壳蛋白的生物信息学分析、纯化及多克隆抗体制备[J]. 南华大学学报(医学版), 2023, 0(6): 829-833 |
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| 作者姓名： | 王巧 陈芝喜 |
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| 作者单位： | 南华大学衡阳医学院附属第一医院 超声影像科,湖南衡阳421001;南华大学衡阳医学院附属第一医院 输血科,湖南衡阳421001 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金(2021JJ70115);衡阳市科技局项目(2020hcjz6717) |
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| 摘 要： | 目的分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核衣壳(N)蛋白的生物学性质、纯化及多克隆抗体制备。 方法NCBI检索感染人的冠状病毒N蛋白氨基酸序列,采用Clustal Omega软件对其进行序列比对。利用SOPMA软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的二级结构;应用Pondr和IUPred软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的固有无序结构域;运用MoRFchib软件预测SARS-CoV-2 N蛋白的分子识别特征序列;利用IEDB网络分析其B细胞表位。纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,分离小鼠血清,制备多克隆抗体;ELISA法测定血清中多克隆抗体滴度;MTT法检测N蛋白刺激小鼠脾细胞增殖情况。 结果SARS-CoV-2 N蛋白与SARS-CoV N蛋白的同源性高于97%。N蛋白二级结构的无规卷曲占55.13%,α螺旋占21.24%,β折叠占16.71%,β转角占6.92%。N蛋白含有大量固有无序样结构,具有4个分子识别特征序列和11个线性B细胞表位。全长为51.5 kDa N蛋白可诱导BALB/c小鼠分泌高滴度抗体,并能导致淋巴细胞增殖。 结论SARS-CoV-2 N蛋白含有大量固有无序结构域并获得了高滴度多克隆抗体。
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| 关 键 词： | 冠状病毒 核衣壳蛋白 生物信息学 免疫学性质 [ |
| 收稿时间： | 2022-10-10 |
| 修稿时间： | 2023-08-23 |
Bioinformatics analysis, purification and immunological characterization of nucleocapsid protein of SARS-CoV-2 |
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| WANG Qiao,CHEN Zhixi. Bioinformatics analysis, purification and immunological characterization of nucleocapsid protein of SARS-CoV-2[J]. Journal of Nanhua University(Medical Edition), 2023, 0(6): 829-833 |
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| Authors: | WANG Qiao CHEN Zhixi |
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| Affiliation: | Department of Ultrasound Imaging,Hengyang 421001, Hunan, China; Department of Blood Transfusion, the First Affiliated Hospital, Hengyang Medical School, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | coronavirus nucleocapsid protein bioinformatics immunological properties |
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