慢病毒介导的性别决定区 Y框蛋白 9表达下调对抑制 Wnt信号通路调控乳腺癌细胞侵袭能力的影响

目的研究慢病毒介导的性别决定区 Y框蛋白 9(SOX9)表达下调对抑制 Wnt信号通路调控乳腺癌细胞侵袭能力的影响。方法以 Wnt信号通路抑制剂 XAV939处理乳腺癌细胞 MDA?MB?436，噻唑蓝( MTT)法测定细胞增殖活性，蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中 SOX9蛋白及 Wnt信号通路蛋白 β?连环蛋白( β?catenin)、下游靶基因 c?myc表达水平。 SOX9 siRNA慢病毒感染 MDA?MB?436细胞， Realtime PCR和蛋白质印迹法检测干扰效果。细胞划痕实验测定细胞迁移能力， Transwell小室检测细胞侵袭能力，蛋白质印迹法检测细胞中基质金属蛋白酶 ?2(MMP?2)和上皮间质转化( EMT)相关蛋白上皮性钙黏附素(E?cadherin)、神经性钙黏附素( N?cadherin)表达水平。结果 XAV939能够下调 MDA?MB?436细胞增殖活性，抑制乳腺癌细胞中 SOX9蛋白表达，降低 Wnt信号通路蛋白 β?catenin、c?myc表达水平。 SOX9 siRNA慢病毒感染后的 MDA?MB?436细胞中 SOX9 mRNA和蛋白水平降低。下调 SOX9的 MDA?MB?436细胞侵袭数目从( 85.56±4.35)降低至( 64.15±3.25)迁移率从(74.16±6.25)%降低至( 54.12±3.96)%，细胞中 MMP?2蛋白水平降低， E?cadherin蛋白水平升高， N?cadherin蛋白水，平降低。 XAV939也能够下调 MDA?MB?436细胞侵袭数目从( 85.56±4.35)降低至( 51.23±2.87)迁移率从( 74.16±6.25)%降低至( 45.28± 3.59)%，抑制细胞中 MMP?2蛋白表达，促进 E?cadherin蛋白表达，下调 N?cadherin蛋白表，达水平。 XAV939处理下调 SOX9的 MDA?MB?436细胞，细胞侵袭数目降低至( 34.18±2.59)迁移率降低至( 24.78±1.68)%，细胞中 MMP?2蛋白表达水平下降更多， E?cadherin蛋白水平升高更多， N?cadherin蛋白水平下多。结论抑制 Wnt信号通路下调乳腺癌细胞中 SOX9的表达水平，降更，敲低其表达能够协同 Wnt信号通路抑制剂降低乳腺癌细胞侵袭迁移能力。