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TD-PCR技术用于肠道病毒71的检测
引用本文:高璐璐,陈清,郭江,陈志永,俞守义.TD-PCR技术用于肠道病毒71的检测[J].热带医学杂志,2009,9(12):1377-1379,1384.
作者姓名:高璐璐  陈清  郭江  陈志永  俞守义
作者单位:1. 南方医科大学流行病学系,广州,510515;广州军区空军后勤部,广州,510620
2. 南方医科大学流行病学系,广州,510515
摘    要:目的评价降落聚合酶链反应(touchdown PCR,TD—PCR)检测肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的效能和敏感性。方法根据touchdown原理设计TD-PCR程序,试验选择PCR最佳反应条件,分别与普通PCR及TD—PCR、普通Taq酶与热启动酶扩增效果进行比较.并利用10倍稀释法检验TD—PCR方法的灵敏度。琼脂糖凝胶电泳验证扩增产物,纯化后DNA产物测序验证该方法的特异性。结果TD—PCR的扩增片段条带清晰.检测效果明显优于普通PCR,使用普通Taq酶的TD—PCR比使用热启动酶有更优的性价比,测序证实了此组片段的特异性.cDNA的最低检测浓度为1.031μg/mL。结论成功建立TD—PCR检测EV71的方法,使用普通Taq酶获得理想的检测结果,为快速检测手足口病的病原体提供了可靠的手段。

关 键 词:降落聚合酶链反应  肠道病毒71型  检测

Touchdown PCR Method for Detection of Enterovirus71
GAO Lu-lu,CHEN Qing,GUO Jiang,CHEN Zhi-yong,YU Shou-yi.Touchdown PCR Method for Detection of Enterovirus71[J].Journal Of Tropical Medicine,2009,9(12):1377-1379,1384.
Authors:GAO Lu-lu  CHEN Qing  GUO Jiang  CHEN Zhi-yong  YU Shou-yi
Abstract:
Keywords:
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