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人CD4~+CD25~+调节性T细胞体外扩增研究
引用本文:蓝三春,石蕊,张晓颖,周栋,陈虎.人CD4~+CD25~+调节性T细胞体外扩增研究[J].中国免疫学杂志,2010,26(10).
作者姓名:蓝三春  石蕊  张晓颖  周栋  陈虎
作者单位:军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科,北京,100071
基金项目:全军医药卫生科研基金课题 
摘    要:目的:建立有效的体外培养扩增人CD4+CD25+Treg细胞的体系,为临床输注供者来源的CD4+CD25+细胞抑制急性移植物抗宿主病(Auctegraft versus host disease,aGVHD)提供实验基础。方法:用免疫磁珠分选法从健康人外周血淋巴细胞中得到CD4+T细胞、CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+Treg细胞。分别进行长期培养、扩增;流式分析其表型及FOXP3表达,MTT法检测体外扩增的CD4+CD25+Treg对自体和异体的CD4+T细胞增殖的抑制作用。结果:经过3周培养,三组细胞均有明显的扩增。磁珠分选后的CD4+CD25+Treg细胞的扩增倍数为(20±8)倍,细胞纯度由89.28%±2.43%下降到76.36%±2.38%。CD4+CD25-T细胞组扩增迅速,倍数为(110±21)倍,并且CD4+CD25+Treg细胞的比例由培养前0.55%±0.27%增加到53.73%±3.81%。CD4+T细胞组扩增倍数为(89±8)倍,并且CD4+CD25+Treg细胞的比例由10.63%±3.87%增加到70.93%±1.71%。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体和异体的CD4+T细胞增殖均有明显的抑制作用,并且随着效靶比浓度的降低而降低。而且其各浓度梯度的抑制作用在自体和异体之间无明显的差异。结论:我们在体外成功扩增了CD4+CD25+Treg细胞,并且具有免疫抑制功能,其中CD4+T细胞组扩增倍数大,细胞数量多,细胞纯度有很大提高,方法简便,有望应用于临床试验。

关 键 词:体外扩增  免疫抑制

In vitro amplification of CD4+CD25+regulatory T cells from the healthy volunteers
LAN San-Chun,SHI Rui,ZHANG Xiao-Ying,ZHOU Dong,CHEN Hu.In vitro amplification of CD4+CD25+regulatory T cells from the healthy volunteers[J].Chinese Journal of Immunology,2010,26(10).
Authors:LAN San-Chun  SHI Rui  ZHANG Xiao-Ying  ZHOU Dong  CHEN Hu
Abstract:
Keywords:CD4+CD25+Treg
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