生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2 |
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作者姓名: | 谢婧 游晓星 曾焱华 李冉辉 陈列松 朱翠明 何军 余敏君 吴移谋 |
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作者单位: | 衡阳市中心医院产科;南华大学病原生物学研究所;南华大学附属南华医院检验科; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31000091,81072418);特殊病原体防控湖南省重点实验室资助项目(湘科计字[2014]5号,湘教通[2012]312号);湖南省科研条件创新专项(2013TT2013) |
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摘 要: | 目的观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导宫颈上皮细胞表达人β防御素2(hBD-2),并探讨其可能的调控机制。方法体外培养End1/E6E7人宫颈上皮细胞,用不同浓度的LAMP作用细胞48 h,反转录PCR检测hBD-2 mRNA的表达,Western blot法检测hBD-2蛋白的表达;用Toll样受体2(TLR2)和TLR6中和抗体孵育End1/E6E7细胞,并用TLR2、TLR6和MyD88负显性突变体转染细胞,以明确TLR2、TLR6和MyD88在介导hBD-2表达中的作用;Western blot法检测核因子κB(NF-κB)p65亚基核转位情况,电泳迁移率实验(EMSA)分析LAMP处理前后NF-κB的DNA结合活性;采用NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)处理,观察对hBD-2表达的影响。结果生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2mRNA和蛋白。TLR2和TLR6中和抗体以及其负显性突变体转染后,能降低hBD-2表达;MyD88负显性突变体也能显著抑制LAMP诱导的hBD-2表达。Western blot结果显示,LAMP处理后可诱导p65核转位,并能增强NF-κB的DNA结合活性。而NF-κB抑制剂PDTC处理后,hBD-2表达降低。结论生殖支原体LAMP可诱导End1/E6E7细胞表达hBD-2,可能受TLR2、TLR6/MyD88/NF-κB调控。
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关 键 词: | 生殖支原体 脂质相关膜蛋白 β-防御素 宫颈上皮细胞 |
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