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| 抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达 | |
| 引用本文： | 武国军,郝晓柯,白玉杰,张盈华,王禾,药立波,季少平,李福洋. 抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达[J]. 医学争鸣, 2000, 21(4): 391-393 |
| 作者姓名： | 武国军 郝晓柯 白玉杰 张盈华 王禾 药立波 季少平 李福洋 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038 2. 第四军医大学,基础部生物化学教研室 3. 第四军医大学,西京医院泌尿外科 |
| 基金项目： | 全军重点实验室基金课题!(1997-71-22) |
| 摘 要： | 目的 构建抗前列腺特异抗原（PSA）单链抗体（scFv)/人羧肽酶A(hCPA)融合基因，为前列腺癌的抗全导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法 在已克隆抗PSAscFv和hCPA基因的基础上，用加端PCR分别在scFv基因的3′端和hCPA基因的5′端加上部分连接肽（linker)基因序列，回收后混合。应用重叠延伸拼接法，将抗PASscFv基因和hCPA基因通过linker序列串联为scFv/hCPA融合基因；并将构建的融合基因克隆到融合表达载体pGEX-4T-1中进行表达。结果 序列测定结果表明，构建的抗PSAscFv/hCPA融合基因中scFv和hCPA序列均正确，scFv和hCPA间有18bp的linker序列，推导的氨基酸序列为GSGGSG，与设计的序列相符，融合基因经IPTG诱导表达重组蛋白并以SDS-PAGE分析，在Mr为94000左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的34%。结论 成功构建并原核表达了抗PSAscFv/hCPA融合基因。 |
| 关 键 词： | 单链抗体 羧肽酶A 融合基因 前列腺肿瘤 抗前列腺特异抗原 |
| 修稿时间： | : |
Construction and expression of a single chain anti-prostate specific antigen a ntibody fused to human carboxypeptidase A |
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| WU Guo-Jun,HAO Xiao-Ke,BAI Yu-Jie,ZHANG Ying-Hua,WANG He,YAO Li-Bo,JI Shao-Ping,LI Fu-Yang. Construction and expression of a single chain anti-prostate specific antigen a ntibody fused to human carboxypeptidase A[J]. Negative, 2000, 21(4): 391-393 | |
| Authors: | WU Guo-Jun HAO Xiao-Ke BAI Yu-Jie ZHANG Ying-Hua WANG He YAO Li-Bo JI Shao-Ping LI Fu-Yang |
| Abstract: | |
| Keywords: | single chain Fv carboxypeptidase A fusion protein prostatic neoplasm |
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