2型糖尿病大鼠肝脏骨形成蛋白9基因表达的变化及意义

目的：观察2型糖尿病大鼠肝细胞中糖、脂代谢调节因子骨形成蛋白9基因转录及表达的变化。方法：实验于2004年在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行。取20只Wistar大鼠单纯随机分为模型组（n=15）与正常对照组（n=5）2组，模型组又按处死时间分为5，10，20d3个时间点，每个时间点5只。①模型组大鼠以高热量饲料喂养4周后，以30mg／kg剂量左下腹腹腔注射链脲佐菌素，继续饲以高热量饲料4周制备2型糖尿病模型，以随机血糖〉11．1mmol／L作为糖尿病模型成功的标志；正常对照组则腹腔注射相同剂量的生理盐水，饲以普通饲料。②模型组于相应时间点处死，正常对照组与20d处死组同时处死，取肝组织，以反转录-聚合酶链反应及Western-blot技术对骨形成蛋白基因转录及蛋白表达水平进行了检测与分析。结果：20只大鼠全部进入结果分析。①反转录-聚合酶链反应产物的凝胶扫描分析定量结果显示模型组中5，10，20d处死大鼠肝骨形成蛋白9基因转录水平均低于正常对照组（0．767&;#177;0．004，0．445&;#177;0．012，0．426&;#177;0．007，0．909&;#177;0．006，t=22．016，45．417，68．364．P〈0．05）。②Western—blot结果显示正常组提取的蛋白在MA3000处可见一条清晰的骨形成蛋白9特异性杂交带，而在5，10，20d处死大鼠肝中骨形成蛋白9表达明显减弱或几乎未见表达。结论：2型糖尿病大鼠体内骨形成蛋白9基因转录及蛋白表达水平较正常均显著降低，这一变化可能与糖尿病的发生、发展有着紧密的联系。

Changes of bone morphogenetic protein-9 gene expression in liver of type 2 diabetic rats and its significance