人转化生长因子基因重组克隆及高效表达

目的　克隆人转化生长因子（ＴＧＦβ１） 基因并且在大肠杆菌中表达。方法　从人的血小板中抽提总ＲＮＡ，经逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ） 得到全长ＴＧＦβ１ ｃＤＮＡ，将其克隆于表达质粒ｐＢＬＭＶＬ２ 中，构建了在ＰＬ 启动子控制的含有ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ重组子，转化到大肠杆菌ＲＲ１ 菌株中，进行温敏诱导表达。结果　表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳染色后，显示其相对分子质量为１２ ．５ ×１０３ ，计算机灰度扫描分析，表达产物约占全菌蛋白的２０％ 左右，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ 分析证实，表达产物为ＴＧＦβ１ ，细胞实验显示其具有一定的生物活性。结论　在大肠杆菌中表达出具有活性的人ＴＧＦβ１ 。这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础。