| HBV C区基因克隆和PCR条件优化 |
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| 引用本文： | 陈思礼,袁媛.HBV C区基因克隆和PCR条件优化[J].中国热带医学,2007,7(8):1279-1280,1284. |
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| 作者姓名： | 陈思礼 袁媛 |
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| 作者单位： | 1. 中南民族大学生命科学学院,湖北武汉430074
2. 华中师范大学生命科学学院,湖北武汉430079 |
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| 基金项目： | 国家民委自然科学基金重点资助项目（MZZ04002）和中南民族大学自然科学基金资助项目（YZZ04006） |
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| 摘 要： | 目的 建立PCR优化条件和方法,探讨HBV C区基因在乙型肝炎PCR检测中的应用价值,为荧光定量PCR检测HBV摸索条件.方法 将HBV基因组导入DH5α大肠杆菌,SDS碱裂解法小量提取大肠杆菌阳性构建质粒DNA,设计合适引物对HBV C区基因进行PCR扩增,对PCR条件中的退火温度、Mg2＋浓度进行了优化,并比较三种不同Taq DNA聚合酶的灵敏度.结果 转化的大肠杆菌质粒DNA最佳退火温度为58℃,最佳Mg2＋浓度为1.5mM,同时确定天源公司的Biostar Taq DNA聚合酶灵敏度最高,扩增到10-6.结论 确立了HBV C区PCR的优化条件,将为后期进行荧光定量PCR检测HBV感染奠定基础以及为探索更有效的检测方法提供实验依据.
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| 关 键 词： | 乙型肝炎 HBV C区基因 克隆 PCR条件优化 |
| 文章编号： | 1009-9727（2007）8-1279-02 |
| 修稿时间： | 2007-04-01 |
Cloning of HBV Gene of C region and optimization of PCR conditions. |
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| CHEN Si-li,YUAN Yuan.Cloning of HBV Gene of C region and optimization of PCR conditions.[J].China Tropical Medicine,2007,7(8):1279-1280,1284. |
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| Authors: | CHEN Si-li YUAN Yuan |
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| Institution: | 1. College of Life Science, South - Central Nationality University, Wuhan 430074, Hubei, P. R. China; 2. College of Life Science, Central China Normal University, Wuhan 430079, Hubei, P. R.China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B HBV gene of C region Clonig Optimization of PCR detecting conditions |
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