PIK3R3对三阴性乳腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响

摘要:目的 观察 PIK3R3在三阴性乳腺癌细胞中的表达及其对肿瘤细胞增殖、迁移活动的影响和可能的机制。方 法 首先,采用免疫组织化学方法检测53例三阴性乳腺癌组织及正常乳腺组织标本内 PIK3R3的阳性表达率,分析 PIK3R3与临床病理参数(肿瘤 TNM 分期和淋巴结转移情况)之间的相关性。然后将人三阴性乳腺癌细胞株 MDA-MB231瞬时转染siRNA-PIK3R3,并设转染无关序列siRNA(siRNA-NC)和未转染细胞(Blank)的对照组,Westernblot检测 细胞内 PIK3R3的表达。在下调 PIK3R3后,用流式细胞术检测 MDA-MB-231细胞凋亡率,MTT 法和 Transwell实验 分别测定 MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,Westernblot检测 MDA-MB-231细胞内磷酸化蛋白激酶(p-AKT)、雌激素 受体(ERα)、G蛋白偶联雌激素受体1(GPER1)蛋白的表达。最后建立动物模型,下调 PIK3R3后验证其对动物体内肿 瘤的影响。结果 PIK3R3在正常乳腺组织中的阳性表达率为22.64%(12/53),而在三阴性乳腺癌组织中的阳性表达 率为60.38%(32/53),明显高于正常组织(P<0.01),且阳性表达率的高低与肿瘤 TNM 分期和淋巴结转移呈正相关(均 P<0.01)。下调 PIK3R3后,MDA-MB-231细胞的凋亡过程几乎未受到影响;Transwell实验结果显示siRNA-PIK3R3 组穿膜细胞数为(89.9±7.3),siRNA-NC组为(161.3±24.7),空白对照组为(178.4±37.7),siRNA-PIK3R3组细胞迁 移能力明显低于siRNA-NC组和空白对照组(均P<0.01);MTT检测结果显示,敲减PIK3R3可以显著抑制 MDA-MB231的增殖;Westernblot检测结果显示,下调 PIK3R3可促进 GPER1的表达。下调 PIK3R3的表达能够延缓小鼠体内 肿瘤生长速度。结论 PIK3R3表达与乳腺癌肿瘤分期密切相关,表明 PIK3R3在乳腺癌的发生及发展过程中发挥重要 作用。使用siRNA 敲减PIK3R3后,细胞凋亡未受影响,却对 MDA-MB-231细胞的增殖和迁移有明显抑制,这为乳腺癌 的治疗和预后提供了新的研究方向。

Effect of PIK3R3 on Invasion and Metastasis of Triple Negative Breast Cancer Cells