人TβRⅡ-ⅠgG1Fc融合基因重组腺病毒载体的构建 |
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引用本文: | 贾利,薛建新,卢铀.人TβRⅡ-ⅠgG1Fc融合基因重组腺病毒载体的构建[J].南方医科大学学报,2008,28(12). |
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作者姓名: | 贾利 薛建新 卢铀 |
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作者单位: | [1]四川大学华西临床医学院,四川成都610041 [2]四川大学华西医院肿瘤中心,四川成都610041 |
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摘 要: | 目的构建含有人TGF-βRⅡ型受体胞外区及ⅠgG1Fc段融合基因的腺病毒载体,并进行初步的功能活性鉴定。方法RT-PCR扩增人TGF-β1Ⅱ型受体胞外区及IgG1Fc段基因。通过Overlap PCR融合为目的基因hTTβRⅡ-ⅠgG1Fc;克隆至pAdTrack-CMV穿梭质粒.线性化后转染含骨架质粒的BJ5183菌.同源重组构建腺病毒质粒;将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞,并扩增、纯化、RT-PCR鉴定;ELISA初步检测重组腺病毒的功能活性。结果目的基因经酶切分析、测序鉴定正确;RT—PCR及ELISA表明重组腺病毒能表达hTβRⅡ-ⅠgG1Fc,中和HLF分泌的TGF-β1。结论成功构建了含融合基因hTβRⅡ-ⅠgG1Fc的腺病毒载体,体外实验证实表达的蛋白具有中和TGF-β1的作用,为进一步研究放射性肺纤维化的基因治疗提供实验依据。
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关 键 词: | TβRⅡ-ⅠgG1Fc基因 重组腺病毒 放射性肺纤维化 基因治疗 |
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